Жир голомянки большой получают экстракцией мезги, ста* билизированной метабисульфитом натрия с помощью эфира при температуре О—4°С с последующей отгонкой экстрагента в вакууме.
К 150 г жира голомянки добавляют 875 г 40%-ного раствора едкого кали в метаноле и перемешивают при комнатной температуре в течение 8 ч в токе аргона. Метанол отгоняют в вакууме в токе аргона до 1/3 первоначального объема. К остатку в токе аргона добавляют двойной объем дистиллированной воды и экстрагируют эфиром, насыщенным дистиллированной водой и аргоном, порциями до полного истощения неомыляемой части жира. Остаток после экстрагирования подкисляют 5 н. серной кислотой под слоем эфира в токе аргона при охлаждении до pH 3 и трижды экстрагируют равными объемами эфира, барботированного аргоном. Объединенные эфирные вытяжки промывают водой, насыщенной эфиром и аргоном, до нейтральной реакции и сушат безводным сульфатом натрия. Сульфат натрия отделяют, эфир отгоняют в вакууме в токе аргона и получают концентрат 1 ненасыщенных высших жирных кислот. Числовые показатели: вес 125 г; кислотное число 3,45; йодное число 145; перекисное число 0,015; содержание 5, 8, 11, 14-эйко* затетраеновой кислоты около 2,6 г; содержание 5, 8, 11, 14, 17-эйкозапентаеновой кислоты около 1 г.
К концентрату 1 ненасыщенных высших жирных кислот добавляют 25 г мочевины, 1,25 л метанола, смесь нагревают до 45°С, затем охлаждают до 4°С и выдерживают при этой температуре 6 ч. В дальнейшем продукт подвергают низкотемпературному фракционированию, освобождению от органических растворителей, хроматографической очистке. Все операции выполняют в токе аргона. В результате получают концентрат II ненасыщенных высших жирных кислот (вес около 20 г; кислотное число 3; йодное число 175; перекисное число 0,609; содержание 5, 8, 11, 14-эйкозатетраеновой кислоты 1,6 а; 5, 8, 11, 14, 17-эйкозапентаеновой кислоты 0,6 г). Полученные кислоты включают в биосинтез.
Полиеновые кислоты смешивают с 3 л гомогенизированной в аммонийном буфере (pH 8,5) обезжиренной бычьей спермой (500 г спермы нг 2,5 л буферного раствора) и инкубируют аэробно при перемешивании в течение 4 ч при температуре 37°С, после чего в реактор добавляют 5 н. НС1 до pH 3,5. Экстракцию ПГ осуществляют эфиром и аргоном до pH не ниже 5,0, затем упаривают в вакууме в токе аргона до сухого остатка. Сухой остаток растворяют в этиловом спирте и хроматографируют в тонком слое сорбента на силикагеле G («Мегк», ФРГ) с использованием системы:              этилацетат—
ИОНЫ МАСС-СПЕКТРА

м/е	%	м/е	%	м/е	%	м/е	%
73	51,3	199	45,4	353	78,2	552	23,5
75	91,2	217	83,6	366	74,9	571	4,7
129	40,3	237	73,9	374	37,0	642	3,0
173	55,9	311	36,6	462	34,5
191	100,0	313	25,6	481	34,5	—	—

уксусная кислота—изооктан—вода (110:20:50:100). Зону с RfO ,32—0,34 элюируют этанолом, элюат упаривают в вакууме в токе аргона.
К 3,5 мл концентрированного элюата добавляют 1,5 мл 1 н. раствора едкого кали, термостатируют при 50°С в течение 30 мин, охлаждают, фильтруют, спектрфотометрируют и определяют максимум поглощения при 278 нм.
Зону с Rf 0,21—0,23 элюируют этанолом, упаривают в вакууме в токе аргона и высушивают до постоянного веса. Аналогично высушивают элюат, 'полученный из зоны с Rf 0,32—0,34.
Навески (0,25 г) высушенных элюатов подвергают хромато- масс-спектрометрии. Полученный масс-спектр имеет все характерные ионы, соответствующие триметилсилильному производному ПГ (табл. 17). Биологическая активность буферных растворов элюатов (pH 6,4), проверенная на изолированном роге матки, соответствует активности ПГЕ2, ПГЕ3, ПГЕ2а и ПГЕаа. Количество биосинтезированных из 150 а жира ПГ групп Е и F составляет в сумме около 0,511 г.