ТЕРПЕНОИДЫ
Среди БАВ гидробионтов терпены и их производные занимают особое место как в силу их значительной распространенности, разнообразия строения, так и необычайно широкого спектра фармакологической активности различных групп. Обычно морские организмы продуцируют «высшие», наиболее сложные по составу терпеноиды — «политерпены» и их различные кислородсодержащие дериваты. Наиболее активными продуцентами морских терпеноидов являются моллюски, кишечнополостные и губки (из морских животных), из морских расте-
ний — бурые и красные водоросли. Терпенонды морских растений менее изучены и менее разнообразны по сравнению с БАВ этой группы морских животных. В литературе имеются различные классификации терпеноидов, иногда подразделяемые на 40 групп. Scheuer (1973) различает следующие группы морских терпеноидов: сесквитерпеноиды, дитерпеноиды с числом углеродных атомов 19, терпеноиды с числом углеродных атомов 21 и тритерпеноиды. Многие терпеноиды, выделенные из морских организмов, обладают антибиотическим, противо- микробным, фунгицидным действием, а также характеризуются нейротропной активностью и способностью ингибировать клеточное деление в различные фазы. Среди терпеноидов морских организмов обнаружены соединения с необычной структурой и с необычным числом атомов углерода в цепи. В частности, такие терпеноиды выделены из губок и кишечнополостных. Значительную группу среди терпеноидов, изолированных из морских губок, составляют так называемые «фурановые» терпеноиды. Так, из губок Spongia nitens выделены терпеноиды нитенин и дигидронитенин, обладающие широким спектром противомикробной активности. Эти терпеноиды изолируют с помощью эфира из метанольной вытяжки измельченных тканей губок Spongia nitens и очищают хроматографически с применением кремниевой кислоты в качестве сорбента (Fattorusso et al., 1971). Нитенин (С21Н24О4) представляет собой бесцветную маслянистую оптически активную жидкость. Находящийся вместе с ним дигидронитенин характеризуется химической формулой С21.Н2б04 и [a]D —- 25,2°. Для их выделения используют свеже- выловленные губки, которые экстрагируют трижды в течение 3 дней метанолом. Из 1 кг губок получают 12,2 г сырого маслянистого экстракта, который очищается хроматографически. Окончательный выход — 4,3 г чистого нитенина и 0,56 г ди- гидронитенина. Весьма близкое строение имеют фуранотерпе- ны, изолированные из губок Spongia officinalis и Hippospongia communis,— фуроспонгин-1, ангидрофуроспонгин-2, изофуро-
спонгин-2, дигидрофуроспонгин-2 и тетрагидрофуроспонгин-2. Для выделения фуроспонгина-1 применяют свежесобранные губки.
Тщательные исследования метанольных вытяжек из губки Spongia officinalis позволили изолировать и идентифицировать новую группу генуицных фуранотерпенов (Cimino et al., 1974). Анализируя содержание тонкослойных хроматограмм (бензол—эфир — 4:1), исследователи определили индивидуальные вещества, характеризующиеся Ш 0,3 и 0,2. Ими оказались близкие по строению фуранотерпены, содержащие модифицированное в ^-гидрокси-а, р-бутенолид и в (3, “у-бутенолид фурано- вое кольцо. Из губки Oligocerus hemorrages выделили фурантер- пен дендролазин. Выделение дендролазина осуществляется по следующей методике: свежевыловленные губки освобождаются
от механических загрязнений, тотчас же погружаются в емкость с изопропиловым спиртом и затем, после высушивания, измельчаются. Измельченные ткани губок трижды экстрагируют хлороформом в течение 24 ч. Хлороформные вытяжки объединяют и подвергают хроматографической очистке. Идентификация дендролазина производится с помощью физико-химических методов и превращения фуранотерпена в его известное производное — пергидродендролазин (Vanderah, Schmitz, 1976). Из австрийских губок были выделены и идентифицированы весьма близкие по строению фуранотерпены: фуроспонгенол, фуро-
спонгенон и тетрагидрофуроспонгин-1 с молекулярными формулами С21Н30О3, С21Н28О3 и С21Н26О3 соответственно (Kazlauskas et al., 1976). Получение этих фуранотерпенов проводилось с использованием перколяции петролейным эфиром. Выход фуранотерпенов — 1—1,3%.
Из губки Pleraplysilla spinifera изолировали фуранотерпены — спиниферин-2 и спиниферин-1. Спиниферин-2 (CisHigO) представляет собой маслообразную жидкость; спиниферин-1 (Ci5Hi60), являющийся изомером спиниферина-2, в отличие от последнего обладает оптической активностью. Содержание спи- ниферина составляет 0,2% от веса высушенных тканей губки Pleraplysilla spinifera, а спиниферина-1 — 0,32;%. Идентификация обоих изомеров осуществляется по данным ИК-, УФ- ЯМР- и масс-спектров (Cimino et al., 1975).
Из ацетоновых экстрактов губки Microciona toxystila посредством противоточного распределения и хроматографической очистки были выделены 4 изомерных терпеноида с молекулярной формулой С15Н22О — микроционин-1, микроционин-2, мик- роционин-3 и микроционин-4. Общее содержание микроциони- нов — 1, 2, 3, 4 в губке Microciona toxystila составляет менее 1% от сухого вещества животного (0,04% приходится на долю микроционина-1, 0,18% — микроционина-2; 0,42% — микроцио- нина-3 и 0,2% — микроционина-4) (Cimino et al., 1975).
В губке обнаружены два новых изомерных фуранотерпена —• ирцинин-3 и ирцинин-4, изолированных в смеси с ранее идентифицированными фуранотерпеноидами.
В ацетоновых экстрактах губки Spongia officinalis (Cimino et al., 1972) и Cacospongia mollior (Cimino et al., 1974) идентифицированы новые тетракарбоциклические терпеноиды — де- оксаскаларин и скаладиал, являющиеся типичными представителями сесквитерпенов (Cimino et al., 1972, 1974).
Из губки Ircinia oros изолировали два новых БАВ терпе- ноиднон природы — ирцинин-1 и ирцинин-2 (Cimino et al., 1971). Выделение новых сесквитерпенов осуществляли путем экстракции ацетоном свежесобранных высушенных губок. Ирцинин-1 и ирцинин-2 являются изомерами, характеризующимися молекулярной формулой С25Н30О, и имеют вид маслянистой жидкости. Идентификация новых сесквитерпенов производится
на основании данных спектрометрических определений и в результате анализа продуктов химических превращений этих БАВ.
Из свежесобранных губок Ircinia fasciculata выделили новое БАВ терпеноидной природы — фасцикулатин. Фасцикулатин — С25Н34О4 -— сепарируют из метанольных экстрактов губок, полученных в результате многократной обработки измельченных высушенных тканей Ircinia fasciculata. Терпеноиды, характеризующиеся выраженной антибиотической активностью, — стро- билинин и вариабилин идентифицировали в экстрактах из высушенных тканей губки Ircinia strobilina (Rothberg, Shubiak, 1975). Оба антибиотика содержатся в количестве 0,05% от веса воздушно сухих тканей губки Ircinia strobilina. Наряду со стробилинином и вариабилином из губки Ircinia strobilina изолировали еще и другие БАВ, весьма близкие по строению и антибиотической активности к стробилинину.
Пентациклический терпен, конденсированный с гидрокси- гидрохиноном,.— дисидеин — выделяли из губки Disidea pal- lescens (Cimino et al., 1974). Для выделения дисидеина — Сз1Н460з — свежесобранные губки освобождают от механических загрязнений, сушат и после измельчения трижды экстрагируют ацетоном. Ацетоновые вытяжки объединяют, упаривают до образования водного остатка и последний экстрагируют последовательно эфиром и н-бутанолом. Очистка дисидеина осуществляется хроматографически.
Довольно интересный в структурном отношении терпеноид аварол получали из губки Disidea avara (Rose et al., 1977). Аварол-2 — (IR)-l, 2, 3, 4, 4a, 7, 8a, а-окта-гидро-l p, p, 4 р-5-тет- раметил-1-гафтил-мутил)-гидрохинон относится к большой группе сесквитерпеноидов с заместителем в виде остатка гидрохинона. Доказательством строения аварола являются данные физико-химического анализа и результаты исследования продуктов химических превращений аварола.
В эфирной фракции ацетоновых экстрактов из измельченных тканей губки Axinella cannabina идентифицированы новые терпеноиды аксизонитрил-1 и аксизотиоцианат (Cafieri et al., 1973). Аксизонитрил-1 (CieH25N) является оптически активным соединением. Его tra. 43—45°С. Другими терпеноидами этой необычной группы являются также характеризующиеся проти- вомикробной активностью акантеллин-1, акантеллин-2 (его изомер), а также близкие к ним вещества, присутствующие совместно в одной фракции, однако в значительно меньших количествах (Minale et al., 1973). Изонитрильные терпеноиды экстрагируют холодным ацетоном (трижды в течение 24 ч) из свежесобранных губок Acanthella acuta. Полученные объединенные ацетоновые вытяжки упаривают, экстрагируют эфиром (трижды) и эфирный экстракт используют как источник целевых терпеноидов. После выпаривания растворителя в остатке остается маслянистая жидкость, которая разделяется и очища-
ется хроматографически. Акантеллины — оптически активные масла, [a]D — 41,2° (акантеллин-1). Позднее Diblasio et al. (1976) обнаружили новые терпеноиды из этой группы — акса- мид-3, аксзотиоцианат-3. Эти терпеноиды были изолированы из губки Axinella cannabina. С этой целью свежесобранные губки освобождают от механических примесей, сушат и экстрагируют в течение 48 ч ацетоном, заменяя растворитель 4 раза. После удаления ацетона под уменьшенным давлением оставшуюся водную фазу трижды экстрагируют этиловым эфиром. После выпаривания эфира оставшаяся маслянистая жидкость подвергается хроматографической очистке и разделению. Аксизони- трил-2 был выделен несколько ранее из этого же вида губки Axinella cannabina (Fattorusso et al., 1974). Аксизонитрил-2 (C16H25N) представляет собой бесцветную маслянистую жидкость, которой свойственна оптическая активность, [ос]б+ +29,0°. Тщательное изучение экстрактов гавайских губок На- lichondria sp., обладающих выраженным противомикробным действием, привело к открытию новых терпеноидов, в молекуле которых идентифицируется изонитрильная функция (Burreson et al., 1975). Среди изолированных из Halichondria sp. БАВ обнаружены сесквитерпены —- изоцианид формамид и изотиоцианат, а также дитерпены —• 3,7, II, 15-тетраметил-1,6,10,14- гексадекатетраены. Изоцианид (C16H25N) плавится при температуре 40—42°С. Экстрагируя свежесобранные воздушно-сухие губки вида Cacospongia scalaris метанолом, Fattorusso et al.
В экстрактах губки Spongia officinalis, а точнее из морфологически различающихся подвидов Spongia officinalis был получен необычного строения дитерпен-лактон-изоагатолактом (Cimino et al., 1974). Пзоагатолактон представляет собой кристаллическое вещество, tna. 153—155°С, оптическая активность 1а]0+6,3°. Из экстрактов, выделенных из губки Disidea palles- cens, был сепарирован новый терпеноид энт-хромазонарол, являющийся представителем класса хроман-сесквитерпеноидных соединений (Cimino et al., 1975).
В ацетоновых экстрактах, полученных из губки Axinella cannabina, дополнительно были обнаружены новые изонитриль- ные терпеноиды — аксизотиоцианат-2, аксамид-1 и аксамид-2 (Fattorusso et al., 1975). Аксизотиоцианат-2 выделили из эфирорастворимой фракции ацетонового экстракта. Аксамид-1 — бесцветная маслянистая жидкость, обладающая оптической активностью, [cc]D+10,0°. Аксамид-2 (Ci6H27NO)—маслянистое вещество, характеризующееся оптической активностью [a]D+37,5°.
В экстрактах из губки Pleraplysilla spinifera Cimino et al.
гидродендролазин (С15Н20О) — оптически активная маслообразная жидкость. Плераплизилин (Q5H20O) по внешнему виду также напоминает маслообразное вещество, не обладающее оптической активностью. Содержание обоих терпеноидов в губке Pleraplysilla spinifera достигает 5% от веса высушенных тканей.
Изучение противомикробных свойств этанольных экстрактов, полученных из губок Halichondria panicea, привело к открытию новых БАБ терпеноидной природы, явившихся ароматическими сесквитерпенами, включающими хинолы или хиноны (Cimino et al., 1973). Строение и подлинность новых БАБ данной группы терпенов, идентифицированных в губке Halichondria panicea,— паницсина А, паницеина В и паницеина С — установлены на основании изучения их спектральных характеристик и свойств продуктов их химических превращений.
ний — бурые и красные водоросли. Терпенонды морских растений менее изучены и менее разнообразны по сравнению с БАВ этой группы морских животных. В литературе имеются различные классификации терпеноидов, иногда подразделяемые на 40 групп. Scheuer (1973) различает следующие группы морских терпеноидов: сесквитерпеноиды, дитерпеноиды с числом углеродных атомов 19, терпеноиды с числом углеродных атомов 21 и тритерпеноиды. Многие терпеноиды, выделенные из морских организмов, обладают антибиотическим, противо- микробным, фунгицидным действием, а также характеризуются нейротропной активностью и способностью ингибировать клеточное деление в различные фазы. Среди терпеноидов морских организмов обнаружены соединения с необычной структурой и с необычным числом атомов углерода в цепи. В частности, такие терпеноиды выделены из губок и кишечнополостных. Значительную группу среди терпеноидов, изолированных из морских губок, составляют так называемые «фурановые» терпеноиды. Так, из губок Spongia nitens выделены терпеноиды нитенин и дигидронитенин, обладающие широким спектром противомикробной активности. Эти терпеноиды изолируют с помощью эфира из метанольной вытяжки измельченных тканей губок Spongia nitens и очищают хроматографически с применением кремниевой кислоты в качестве сорбента (Fattorusso et al., 1971). Нитенин (С21Н24О4) представляет собой бесцветную маслянистую оптически активную жидкость. Находящийся вместе с ним дигидронитенин характеризуется химической формулой С21.Н2б04 и [a]D —- 25,2°. Для их выделения используют свеже- выловленные губки, которые экстрагируют трижды в течение 3 дней метанолом. Из 1 кг губок получают 12,2 г сырого маслянистого экстракта, который очищается хроматографически. Окончательный выход — 4,3 г чистого нитенина и 0,56 г ди- гидронитенина. Весьма близкое строение имеют фуранотерпе- ны, изолированные из губок Spongia officinalis и Hippospongia communis,— фуроспонгин-1, ангидрофуроспонгин-2, изофуро-
спонгин-2, дигидрофуроспонгин-2 и тетрагидрофуроспонгин-2. Для выделения фуроспонгина-1 применяют свежесобранные губки.
Тщательные исследования метанольных вытяжек из губки Spongia officinalis позволили изолировать и идентифицировать новую группу генуицных фуранотерпенов (Cimino et al., 1974). Анализируя содержание тонкослойных хроматограмм (бензол—эфир — 4:1), исследователи определили индивидуальные вещества, характеризующиеся Ш 0,3 и 0,2. Ими оказались близкие по строению фуранотерпены, содержащие модифицированное в ^-гидрокси-а, р-бутенолид и в (3, “у-бутенолид фурано- вое кольцо. Из губки Oligocerus hemorrages выделили фурантер- пен дендролазин. Выделение дендролазина осуществляется по следующей методике: свежевыловленные губки освобождаются
от механических загрязнений, тотчас же погружаются в емкость с изопропиловым спиртом и затем, после высушивания, измельчаются. Измельченные ткани губок трижды экстрагируют хлороформом в течение 24 ч. Хлороформные вытяжки объединяют и подвергают хроматографической очистке. Идентификация дендролазина производится с помощью физико-химических методов и превращения фуранотерпена в его известное производное — пергидродендролазин (Vanderah, Schmitz, 1976). Из австрийских губок были выделены и идентифицированы весьма близкие по строению фуранотерпены: фуроспонгенол, фуро-
спонгенон и тетрагидрофуроспонгин-1 с молекулярными формулами С21Н30О3, С21Н28О3 и С21Н26О3 соответственно (Kazlauskas et al., 1976). Получение этих фуранотерпенов проводилось с использованием перколяции петролейным эфиром. Выход фуранотерпенов — 1—1,3%.
Из губки Pleraplysilla spinifera изолировали фуранотерпены — спиниферин-2 и спиниферин-1. Спиниферин-2 (CisHigO) представляет собой маслообразную жидкость; спиниферин-1 (Ci5Hi60), являющийся изомером спиниферина-2, в отличие от последнего обладает оптической активностью. Содержание спи- ниферина составляет 0,2% от веса высушенных тканей губки Pleraplysilla spinifera, а спиниферина-1 — 0,32;%. Идентификация обоих изомеров осуществляется по данным ИК-, УФ- ЯМР- и масс-спектров (Cimino et al., 1975).
Из ацетоновых экстрактов губки Microciona toxystila посредством противоточного распределения и хроматографической очистки были выделены 4 изомерных терпеноида с молекулярной формулой С15Н22О — микроционин-1, микроционин-2, мик- роционин-3 и микроционин-4. Общее содержание микроциони- нов — 1, 2, 3, 4 в губке Microciona toxystila составляет менее 1% от сухого вещества животного (0,04% приходится на долю микроционина-1, 0,18% — микроционина-2; 0,42% — микроцио- нина-3 и 0,2% — микроционина-4) (Cimino et al., 1975).
В губке обнаружены два новых изомерных фуранотерпена —• ирцинин-3 и ирцинин-4, изолированных в смеси с ранее идентифицированными фуранотерпеноидами.
В ацетоновых экстрактах губки Spongia officinalis (Cimino et al., 1972) и Cacospongia mollior (Cimino et al., 1974) идентифицированы новые тетракарбоциклические терпеноиды — де- оксаскаларин и скаладиал, являющиеся типичными представителями сесквитерпенов (Cimino et al., 1972, 1974).
Из губки Ircinia oros изолировали два новых БАВ терпе- ноиднон природы — ирцинин-1 и ирцинин-2 (Cimino et al., 1971). Выделение новых сесквитерпенов осуществляли путем экстракции ацетоном свежесобранных высушенных губок. Ирцинин-1 и ирцинин-2 являются изомерами, характеризующимися молекулярной формулой С25Н30О, и имеют вид маслянистой жидкости. Идентификация новых сесквитерпенов производится
на основании данных спектрометрических определений и в результате анализа продуктов химических превращений этих БАВ.
Из свежесобранных губок Ircinia fasciculata выделили новое БАВ терпеноидной природы — фасцикулатин. Фасцикулатин — С25Н34О4 -— сепарируют из метанольных экстрактов губок, полученных в результате многократной обработки измельченных высушенных тканей Ircinia fasciculata. Терпеноиды, характеризующиеся выраженной антибиотической активностью, — стро- билинин и вариабилин идентифицировали в экстрактах из высушенных тканей губки Ircinia strobilina (Rothberg, Shubiak, 1975). Оба антибиотика содержатся в количестве 0,05% от веса воздушно сухих тканей губки Ircinia strobilina. Наряду со стробилинином и вариабилином из губки Ircinia strobilina изолировали еще и другие БАВ, весьма близкие по строению и антибиотической активности к стробилинину.
Пентациклический терпен, конденсированный с гидрокси- гидрохиноном,.— дисидеин — выделяли из губки Disidea pal- lescens (Cimino et al., 1974). Для выделения дисидеина — Сз1Н460з — свежесобранные губки освобождают от механических загрязнений, сушат и после измельчения трижды экстрагируют ацетоном. Ацетоновые вытяжки объединяют, упаривают до образования водного остатка и последний экстрагируют последовательно эфиром и н-бутанолом. Очистка дисидеина осуществляется хроматографически.
Довольно интересный в структурном отношении терпеноид аварол получали из губки Disidea avara (Rose et al., 1977). Аварол-2 — (IR)-l, 2, 3, 4, 4a, 7, 8a, а-окта-гидро-l p, p, 4 р-5-тет- раметил-1-гафтил-мутил)-гидрохинон относится к большой группе сесквитерпеноидов с заместителем в виде остатка гидрохинона. Доказательством строения аварола являются данные физико-химического анализа и результаты исследования продуктов химических превращений аварола.
В эфирной фракции ацетоновых экстрактов из измельченных тканей губки Axinella cannabina идентифицированы новые терпеноиды аксизонитрил-1 и аксизотиоцианат (Cafieri et al., 1973). Аксизонитрил-1 (CieH25N) является оптически активным соединением. Его tra. 43—45°С. Другими терпеноидами этой необычной группы являются также характеризующиеся проти- вомикробной активностью акантеллин-1, акантеллин-2 (его изомер), а также близкие к ним вещества, присутствующие совместно в одной фракции, однако в значительно меньших количествах (Minale et al., 1973). Изонитрильные терпеноиды экстрагируют холодным ацетоном (трижды в течение 24 ч) из свежесобранных губок Acanthella acuta. Полученные объединенные ацетоновые вытяжки упаривают, экстрагируют эфиром (трижды) и эфирный экстракт используют как источник целевых терпеноидов. После выпаривания растворителя в остатке остается маслянистая жидкость, которая разделяется и очища-
ется хроматографически. Акантеллины — оптически активные масла, [a]D — 41,2° (акантеллин-1). Позднее Diblasio et al. (1976) обнаружили новые терпеноиды из этой группы — акса- мид-3, аксзотиоцианат-3. Эти терпеноиды были изолированы из губки Axinella cannabina. С этой целью свежесобранные губки освобождают от механических примесей, сушат и экстрагируют в течение 48 ч ацетоном, заменяя растворитель 4 раза. После удаления ацетона под уменьшенным давлением оставшуюся водную фазу трижды экстрагируют этиловым эфиром. После выпаривания эфира оставшаяся маслянистая жидкость подвергается хроматографической очистке и разделению. Аксизони- трил-2 был выделен несколько ранее из этого же вида губки Axinella cannabina (Fattorusso et al., 1974). Аксизонитрил-2 (C16H25N) представляет собой бесцветную маслянистую жидкость, которой свойственна оптическая активность, [ос]б+ +29,0°. Тщательное изучение экстрактов гавайских губок На- lichondria sp., обладающих выраженным противомикробным действием, привело к открытию новых терпеноидов, в молекуле которых идентифицируется изонитрильная функция (Burreson et al., 1975). Среди изолированных из Halichondria sp. БАВ обнаружены сесквитерпены —- изоцианид формамид и изотиоцианат, а также дитерпены —• 3,7, II, 15-тетраметил-1,6,10,14- гексадекатетраены. Изоцианид (C16H25N) плавится при температуре 40—42°С. Экстрагируя свежесобранные воздушно-сухие губки вида Cacospongia scalaris метанолом, Fattorusso et al.
- в эфирных вытяжках из готового экстракта обнаружили первый пентациклический терпеноид скаларин.
В экстрактах губки Spongia officinalis, а точнее из морфологически различающихся подвидов Spongia officinalis был получен необычного строения дитерпен-лактон-изоагатолактом (Cimino et al., 1974). Пзоагатолактон представляет собой кристаллическое вещество, tna. 153—155°С, оптическая активность 1а]0+6,3°. Из экстрактов, выделенных из губки Disidea palles- cens, был сепарирован новый терпеноид энт-хромазонарол, являющийся представителем класса хроман-сесквитерпеноидных соединений (Cimino et al., 1975).
В ацетоновых экстрактах, полученных из губки Axinella cannabina, дополнительно были обнаружены новые изонитриль- ные терпеноиды — аксизотиоцианат-2, аксамид-1 и аксамид-2 (Fattorusso et al., 1975). Аксизотиоцианат-2 выделили из эфирорастворимой фракции ацетонового экстракта. Аксамид-1 — бесцветная маслянистая жидкость, обладающая оптической активностью, [cc]D+10,0°. Аксамид-2 (Ci6H27NO)—маслянистое вещество, характеризующееся оптической активностью [a]D+37,5°.
В экстрактах из губки Pleraplysilla spinifera Cimino et al.
- , идентифицировали два новых сесквитерпеноида — де- гидродендролазин и плераплизилин, причем последний представляет новый тип структуры природных сесквитерпенов. Де-
гидродендролазин (С15Н20О) — оптически активная маслообразная жидкость. Плераплизилин (Q5H20O) по внешнему виду также напоминает маслообразное вещество, не обладающее оптической активностью. Содержание обоих терпеноидов в губке Pleraplysilla spinifera достигает 5% от веса высушенных тканей.
Изучение противомикробных свойств этанольных экстрактов, полученных из губок Halichondria panicea, привело к открытию новых БАБ терпеноидной природы, явившихся ароматическими сесквитерпенами, включающими хинолы или хиноны (Cimino et al., 1973). Строение и подлинность новых БАБ данной группы терпенов, идентифицированных в губке Halichondria panicea,— паницсина А, паницеина В и паницеина С — установлены на основании изучения их спектральных характеристик и свойств продуктов их химических превращений.