Метафаза II
Большинство данных, касающихся анализа хромосом в оогенезе у человека, получено на препаратах ооцитов, не оплодотворившихся в культуре in vitro и блокированных на стадии метафазы второго деления мейоза (MII). Анализ данных литературы позволяет сделать вывод о высокой частоте и широком диапазоне различных типов хромосомных аномалий в ооцитах человека в МП. Так, частота ооцитов, несущих одну или более хромосомную аберрацию, в разных сериях исследований варьирует от 4 % [386] до 58 % [897]. Значительная вариабельность полученных результатов может быть обусловлена как методами приготовления хромосомных препаратов, существенно влияющих на качество метафазных пластинок, так и трудностями идентификации и подсчета конденсированных хромосом. Нельзя не отметить и отсутствие унифицированного подхода к отбору ооцитов и метафазных пластинок для анализа.
Однако результаты многочисленных зарубежных исследований [302, 424, 574, 905], а также собственные данные [36, 37] свидетельствуют о высоком уровне спонтанной анеуплоидии в ооцитах на стадии МП и подтверждают тенденцию к ее увеличению с возрастом женщины. Так, в наших исследованиях из 133 овулировавших ооцитов человека, пригодных для цитогенетического анализа на стадии МП, 30 оказались анеуплоидными, причем частота гипер- и гипогаплои- дии была одинаковой (14 и 16 ооцитов соответственно), что косвенно свидетельствовало об адекватности использованного метода приготовления хромосомных препаратов. В 19 случаях (63,3 %) в образовании анеуплоидных ооцитов принимали участие отдельные хроматиды (табл. 5.1). Не исключено, что их наличие обусловлено преждевременным разделением центромер или так называемым «предделением» [424], которое встречается на этой стадии с частотой до 30 % [574]. Так как практически все исследования проведены на ооцитах с признаками дегенерации, нельзя исключить, что преждевременное разделение центромер было обусловлено именно этим обстоятельством [449], либо связано с методическими артефактами. Однако существование такого механизма нерасхождения хромосом в оогенезе доказано в прямых экспериментах на мышах в условиях применения окадаевой кислоты — препарата, вызывающего преждевременную спирализацию хромосом [55, 57].
Частота диплоидных ооцитов в нашем исследовании составила 9 % (табл. 5.1). При этом в 11 случаях 1-е полярное тельце отсутствовало, а в одном ооците с кариотипом 46,ХХ было обнаружгно дегенерировавшее полярное тельце, содержащее диплоидный набор хромосом, что доказывало его происхождение из тетраплоидного оогония. Диплоидные ооциты, возникающие из тетраплоидных оогониев вследствие нарушения цитотомии или в результате слияния двух оогониев встречаются достаточно редко [52]. По-видимому, основной причиной образования диплоидных ооцитов является блокада анафазы I, которая приводит к персистенции в ооплазме второго диплоидного набора хромосом.
Структурные аномалии хромосом обнаружены в 10 ооцитах, причем во всех случаях они сочетались с анеуплоидией (табл. 5.1). К сожалению, попытки идентифицировать структурные аберрации оказались безуспешными.
Эти наблюдения хорошо согласуются с результатами аналогичных исследований, проведенных в Великобритании. При кариотипиро- вании 1397 ооцитов на стадии МП в 151 (11 %), была выявлена анеу- плоидия, причем более чем в половине случаев она была обусловлена преждевременным делением центромеры, результатом чего было появление непарных (лишних) хроматид [614]. В этих же исследованиях была четко установлена прямая корреляция частоты хромосомных аберраций в ооцитах МП с возрастом женщины. У женщин моложе 27 лет она составляла около 7,4 %, тогда как у женщин старше 39 лет достигала 39 % [603].
Таким образом, частота хромосомных аберраций, регистрируемая в оогенезе на стадии метафазы второго мейотического деления, очень
Таблица 5.1. Результаты цитогенетического анализа ооцитов человека на стадии метафазы II, не оплодотворившихся в условиях культуры
Кариотип |
Число ооцитов |
|
Норма |
23,Х |
79 |
|
26,X,+D,+E,+E,+Fcht,+Gcht |
1 |
|
26,X,+C,+C,+G,+Ccht,+Ccht |
1 |
|
26,X,+B,+C,+E |
1 |
|
24,X,+C |
4 |
Гипергаплоидия (n = 14) |
24,X,+E |
2 |
|
24,X,+G |
2 |
|
24,X,+C,+Ccht |
1 |
|
23,X,+Echt,+Echt |
1 |
|
23,X, +Acht, +Acht |
1 |
|
19,?X,-C,-E,-F,-F |
1 |
|
19,X,-D,-F,-G,-G |
1 |
|
20,?X,-C,-E,-E |
1 |
|
20,?X,-C,-D,-D,+Ccht |
1 |
|
21,?X,-C,-E,+Gcht |
1 |
|
21,?X,-C,-C,+Acht,+Acht,+Ccht |
1 |
Гипогаплоидия (n = 16) |
21,X,-D,-E |
1 |
|
21,X,-F,-F |
1 |
|
21,X,-D,-G |
1 |
|
22,X,-A |
1 |
|
22,?X,-C |
1 |
|
22,X,-E,+Echt,+Echt |
1 |
|
22,X,-G |
4 |
|
30,X,+C,+C,+D,+D,+D,+E,+E,-F,+G |
1 |
|
25,?X,-C,-C,+D,+D,+E,+E,+Echt,+Echt |
1 |
|
24,X,+C,+D,-G,+Gcht |
1 |
Сочетания нуллисомий и |
23,X,+D,-G,+Gcht |
1 |
дисомий (n = 8) |
22,X,-A,+D,+D,-F,-G, +Acht,+Acht,+Acht |
1 |
|
21,?X,-C,-C,-C,+D,+D,-E,+Echt,+Echt |
1 |
|
21,X,+C,-D,-E,-E |
1 |
|
20,X,+C,-E,-E,-E,-F |
1 |
|
25,X,+D,+G,+mar1,+mar2,+mar3, +mar4, +m ar5 25,X,+C,+D,+Fcht,+mar1,+mar2 24,X,+F,+Ccht,+mar1,+mar2 |
1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 |
Структурные аномалии (n = 10) |
24,X,+derB 24,X, +A,+C,-E,+Echt,+Echt, +mar1 23,X,+Acht,+mar 1 22,?X,der(B),-C,-C,+D 21,X,-E,-F,+Echt,+Echt, +mar1,+mar2 19,?X,-C,-E,-G,-G,+mar1,+mar2,+mar3,+mar4 18,?X,-C,-D,-D,-F,-G,+mar1,+mar2 |
|
|
46,XX |
6 |
Полиплоидия(n = 13) |
44~47lt;2ngt;,XX |
6 |
|
85~93lt;4ngt;,XXXX |
1 |
высока и по некоторым данным затрагивает почти половину всех ооцитов, завершивших первое деление созревания. Их большая часть, по-видимому, не способна дать начало жизнеспособному потомству. Однако многие из них могут быть оплодотворены и завершают второе мейотическое деление. Следует подчеркнуть, что практически все исследования проведены на яйцеклетках, имеющих признаки дегенерации, а потому не использованных в программе ЭКО. Возможно, именно этим можно отчасти объяснить столь высокую частоту хромосомных аберраций в метафазе II.
А так же в разделе «Метафаза II »
- введение
- Хромосомные аномалии в гаметогенезе
- сперматогенез
- оогенез
- Метафаза I
- Завершение мейоза
- Хромосомные аномалии в эмбриогенезе
- доимплантационные стадии развития
- Полиплоидия
- Анеуплоидия
- Мозаичная гетероплоидия
- Постимплантационные стадии развития
- спектр спонтанных хромосомных аномалий на разных стадиях развития
- Трисомия аутосом
- двойные трисомии
- Моносомия
- Полиплоидия
- Заключение