Эффективность дезинфекции в очаге контролируют дезинфекционные станции и дезинфекционные отделения санитарно-эпидемиологических станций.
Основные, наиболее распространенные методы контроля эффективно­сти обеззараживания белья, выделений, поверхностей и посуды при кишеч­ных инфекциях н туберкулезе. Усовершенствованию методов лабораторных испытаний дезинфицирующих средств посвящена большая литература. Критерием жизнеспособности микроорганизмов обычно служит образование ими колоний на плотной среде, образование мути в пробирках с бульоном или инфицирование живой ткани (О. П. Тимонич, 1950; Е. К. Серебря­кова, 1957, и др.).
Инструкция рекомендует пользоваться в качестве тест-культур золо­тистым стафилококком и кишечной палочкой.
Бактериологический контроль качества дезинфекционной обработки очагов кишечных инфекций. Бактериологический контроль качества обеззараживания очагов кишечных инфекций (дизентерия, брюшной тнф, паратифы А и Б, инфекционный гепа­тит и др.) при проведении заключительной и текущей дезинфекции производят методом обнаружения кишечной палочки. Кишечная палочка по своей устойчивости к дезин­фекционным средствам близка к устойчивости возбудителей кишечных инфекций. Поэ­тому обнаружение при бактериологическом контроле кишечной палочки после Прове-
дения заключительной или текущей дезинфекции свидетельствует о неудовлетвори­тельном качестве обеззараживания очага кишечных инфекций.
При проведении контроля качества заключительной дезинфекции забор проб производят с поверхности тех предметов, которые играют преимущественную роль в механизме передачи кишечных инфекций, а именно: в уборной (ручка слива, поверх­ность унитаза, дверь, ночной горшок); матрац, одеяло больного; пол, подоконники, стены у постели больного; игрушки, предметы обстановки, посуда (столовая и чай­ная), дверь комнаты и др. При этом обязательно учитывать возможность повторного инфицирования тех или других объектов. При контроле качества текущей дезинфекции забор проб, помимо указанных предметов, производят также с платья и рук у хаживающего персонала.
При обработке помещений хлорсодержащими дезинфекционными средствами про­бы берут при помощи ватных тампонов, смоченных стерильным 1% раствором гипо­сульфита.
Растворы гипосульфита (1%) стерилизуют в автоклаве при давлении 0,75— 1 атм. в течение 20 минут. Хранят простернлизованный раствор гипосульфита в темном месте и не более 7—10 дней.
В случаях применения для обеззараживания других дезинфекционных средств (лизол, нафтализол и др.) пробы берут ватным тампоном, смоченным стерильной водо­проводной водой.
Смывы производят с 5—10 предметов с охватом площади каждого размером не менее 200—300 см². Указанный размер площади определяют наложением на 2—3 смежных участка обследуемого объекта стерильного трафарета — рамки (деревянной, картонной, металлической), просвет которой равен 100 см².
При заборе проб с игрушек, посуды и т. п. смывы тампоном производят с поверх­ности всего объекта, с каждого предмета — одним тампоном (всеми его сторонами) и при помощи одного и того же трафарета. Тампон после использования помещают обратно в стерильную пробирку, а края ее обжигают на пламени горелки.
На пробирке должен быть отмечен порядковый номер и под тем же номером заносят в список предмет, с которого взята проба.
Пробы берут с учетом срока экспозиции для обеспечения бактерицидного дей­ствия дезинфекционного средства и устранения возможности повторного инфицирова­ния предмета не ранее 45 минут и не позже 1—2 часов по окончании дезинфекции очага.
При заборе проб записывают адрес, фамилию, имя, отчество и возраст больного, диагноз, дату заболевания, дату госпитализации, дату н время дезинфекции, дату и время забора проб, санитарное состояние квартиры, была ли произведена текущая дезинфекция, способ дезинфекции посуды и белья (обработка дезинфицирующим сред­ством или кипячением) и фамилии дезинфекторов бригады.
Пробы доставляют в лабораторию не позднее 2 часов после снятия смывов.
Методика лабораторного исследования (вариант 1). Тампоны, достав­ленные в лабораторию, погружают в пробирку (того же диаметра, в кото­рой находился тампон), с 5 мл среды Эйкмана.
Засеянные пробирки ставят в термостат при температуре 42—43° на 18 часов, а затем, при наличии помутнения, платиновой петлей на среду Эндо в чашку Петри делают высев.
Для получения изолированных колоний петлю с забранным материалом погру­жают у края чашки Петри в толщу агара, а затем извлекают и делают ею в том же месте ряд штрихов. После этого наносят отдельные штрихи на остальную поверхность сре­ды Эндо.
Засеянные чашки Петри ставят в термостат при температуре 37 или 42—43° до следующего утра.
Утром чашки Петри просматривают и:
1) при отсутствии колоний на среде Эндо исследование заканчивают;
2) при наличии характерных для кишечной палочки колоний делают мазок из отдельной колонии и красят по Граму.
Если при мякроскопировании мазка будут отсутствовать грамотрица- тельные палочки, то на этом этапе исследование заканчивают.
При обнаружении же в мазке грамотрицательной неспороносной палоч­ки производят посев колоний из чашки Петри в среды Гисса или только
в среде с глюкозой. Среды Гнсса разливают в агглютинационные пробирки по 0,5 мл. Засеянные пробирки помещают в термостат при температуре 42—• 43° на 2—3 часа. При наличии по истечении указанного времени в средах Гисса (или в среде с глюкозой и маннитом) кислоты и газа анализ считается законченным и в зависимости от результатов дается оценка качества дезин- -фекционной обработки очага.
Дезинфекцию считают удовлетворительной при отсутствии роста кишеч­ной палочки во всех исследованных смывах, при наличии роста кишечной палочки в одной из 5—10 проб, взятых по прошествии 1—2 часов по окон­чании дезинфекции с тех объектов, на которых исключена возможность повторного инфицирования, как, например, матрац, одеяло, стена у посте­ли больного и т. п.
Дезинфекцию считают неудовлетворительной при обнаружении кишеч­ной палочки хотя бы в одной пробе при выполнении всех перечисленных условий.
Методика лабораторного исследования (вариант 2). Тампоны погружают в пробирки, содержащие 2 мл среды Эйкмана. Засеянные пробирки ставят в термостат или в водяную баню при температуре 42—43" на 6 часов. По прошествии указанного времени градуированной пипеткой переносят 0,5 мл среды Эйкмана из пробирок, в которых обнаружится помутнение, на среду Эндо и равномерно распределяют посев шпателем Дригальского по поверх­ности среды.
Открытые чашки Петри с засеянной средой Эндо помещают в термостат при температуре 42—43° на 30—40 минут для подсушивания, после чего их закрывают крышками и оставляют в этом же термостате на ночь.
В дальнейшем все исследования производят так же, как указано в пер­вом варианте.
Исследование по второму варианту может быть закончено в отличие от первого варианта к концу второго рабочего дня, считая со дня взятия проб.
Методика забора проб с загрязненного фекалиями белья, обеззараженно­го путем замачивания в дезинфицирующих растворах. Из бака или другого сосуда, в котором обеззараживалось белье, по истечении срока экспозиции извлекаются три штуки белья, причем из различных уровней сосуда (верх, -середина, низ—дно).
При помощи платиновой петли, предварительно обожженной на пламени горелки, с каждой из трех штук белья берут небольшой комочек фекалий и засевают на чашку со средой Эндо.
При отсутствии на белье видимых загрязнений соскобы производят с мест, чаще всего подвергающихся загрязнению. При соскобе место забора расправляют и хорошо его натягивают, а затем при помощи фламбирован- ного скальпеля производят соскоб с площади около 100 см². При этом скаль­пель держат под углом к поверхности белья и двигают его только в одном направлении, не допуская перевертывания лезвия.
По окончании взятия пробы скальпель погружают в пробирку с мясо- пептонным бульоном.
При контроле качества обработки белья хлорсодержащими растворами добавля­ют в питательный бульон 1 мл 1% стерильного раствора гипосульфита.
Засеянные в очаге инфекции пробирки и чашки Петри в тот же день .доставляют в лабораторию и помещают в термостат при 37° на 24 часа.
По истечении этого срока:
а) посев из чашек Петри исследуют на кишечную палочку по общепри- нятой методике;
б) из пробирок производят высев на чашки со средой Эндо и помещают в термостат при 37° на 24 часа, после чего ведут исследование на кишечную палочку по принятой методике.
В зависимости от результатов бактериологического исследования дают оценку качества дезинфекции белья. Удовлетворительная — при отсут­ствии роста кишечной палочки во всех исследованных пробах. Неудовлетво­рительная — при обнаружении кишечной палочки хотя бы в одной из взятых проб.
Имеются и другие методы контроля, как, например, определение нали­чия возбудителей дизентерии по нарастанию титра фага.
Контроль эффективности обеззараживания мочи. К моче добавляют дезинфектант или его раствор в количестве, предусмотренном инструкцией. После окончания дезинфекции (экспозиции) в очаге делают посев на среды (следует помнить, что при наличии у дезинфицирующего средства нейтрализатора его следует внести в питательную среду в количестве 1—2 мл на 50 мл бульона, если он индифферентен в отношении микробной клетки); мочу в количестве 1 мл переносят в пробирку с 50 мл бульона; после тщатель­ного смешивания 1 мл жидкости из первой пробирки с бульоном переносят во вторую с таким же количеством среды и затем засевают по 0,1 мл на чашку как из первой, так и из второй пробирки. При заражении мочи кишечной палочкой высев делают на среду Эндо, а стафилококком — на мясо-пептонный агар. Первые пробирки отбра­сывают, посевы доставляют а лабораторию и в тот же день ставят в термостат; через сутки проводят ориентировочный учет результатов, а через 2 суток — окончательный. Отсутствие роста в течение 2 суток указывает на доброкачественность проведенной дезинфекции.
Контроль эффективности обеззараживания кала. В очаге после окончания дезин­фекции берут пробы жидкой части кала пипеткой в одну пробирку, а комочки петлей в другую (лучше петлей в виде ложечки 3 см в диаметре, сделанной из 3—-4 завитков проволочки из перегоревшей электролампы) и помещают в пробирки. Если при дезин­фекции использованы хлорные препараты, то перед взятием проб к бульону в каждой пробирке для нейтрализации остатков хлора добавляют по I мл 0,5% раствора гипо­сульфита. Комочки растирают, перемешивают и из каждой пробирки пипеткой перено­сят по 2 мл в пробирки с бульоном. Из последних двух пробирок делают два посева по 0,2 мл на 4 чашки Петри с элективной средой. Взятые пробы в тот же день доста­вляют в лабораторию и помещают в термостат, через 48 часов проверяют наличие роста. Отсутствие роста кишечной палочки и патогенных микроорганизмов указывает на эффективность дезинфекции.
Определение эффективности обеззараживания посуды. В очаге до и после дезин­фекции отбирают наиболее употребительную посуду: стаканы, блюдца, тарелки, поиль­ники, вилки, ложки и др. (5—6 объектов). Стерильными марлевыми салфеточками (5x5 см), увлажненными стерильной водопроводной водой, с помощью стерильного пинцета протирают отобранную ложку, вилку или квадрат (5x5 см) на посуде. Исполь­зованную салфетку помещают в колбу или пробирку со стерильной водой или 1 % раствором гипосульфита. После тщательного взбалтывания каждой колбы или про­бирки в течение 2 минут салфетку отжимают о внутреннюю стенку сосуда и удаляют. После доставки в лабораторию 0,2 мл жидкости от каждой пробы засевают на ага­ровую среду в чашки Петри и помещают в термостат на 48 часов, а затем подсчиты­вают выросшие колонии. При выявлении колоний, подозрительных на патогенную микрофлору, смыв с салфеток засевают на среду Левина или среду «Ж» для выявления дизентерийной палочки, на среду с кровяным агаром или Гарро (агар с геннианвиоле- том) для выявления гемолитического стрептококка и на среду Вильсон — Блера для выявления палочек брюшного тифа.
Дезинфекция считается удовлетворительной при отсутствии кишечной палочки и отличной, если достигнута полная стерильность.
Определение эффективности обеззараживания поверхностей. При определении эффективности дезинфекции поверхностей в практических условиях берут пробы при помощи салфеточек до и после проведения дезинфекции или только после дезин­фекции.
При использовании для дезинфекции хлорсодержащих препаратов забор проб производят при помощи влажпых. тампонов, смоченных 1% раствором гипосульфита. Последний стерилизуют в автоклаве при давлении 0,75—1 атм. в течение 20 минут. Хранят стерильный раствор гипосульфита в темном месте не долее 7—10 дней. В слу­чае применения для обеззараживания других дезинфицирующих препаратов (лизола,
иафтализола и др.) пробы берут влажными тампонами или салфеточками, смоченными стерильной водопроводной водой.
Смыв при помощи тампонов производят с различных предметов (пяти мест) с охватом площади не менее 500 см². Указанный размер определяют наложением на 2—3 смежных места обследуемого объекта стерильного трафарета — рамы (деревян­ной, картонной, металлической), просвет которой равен 100 см².
После дезинфекции забор проб производят с учетом срока экспозиции, обеспечи­вающей бактерицидное действие дезинфицирующего средства, но не ранее 30 минут н не иозже I часа при вегетативных формах и 2 часов — споровых формах микроорга­низмов.
Пробы берут с поверхностей тех предметов, которые играют преимущественную роль в механизме передачи инфекции: пола, стен у постели больного, игрушек, кухон­ного и обеденного стола, стула, с матрацев, одеяла больного, подоконников, двери комнаты и др.
Количественный показатель убыли микрофлоры выражают в процентах.
Поскольку методы определения во внешней среде возбудителей инфекционных заболеваний разработаны слабо, эффективность обеззараживания определяют по кишеч­ной палочке, которая после дезинфекции не должна обнаруживаться (см. Обеззара­живание в очагах кишечных инфекций).
В настоящее время выдвинуто предложение при обеззараживании в очагах туберкулеза определять эффективность обеззараживания по наличию или отсутствию туберкулезной микобактерии на обеззараженных объектах (см. Обеззараживание при туберкулезе). Но в связи с тем что ее трудно выделить, то об эффективности обезза­раживания в основном судят по наличию или отсутствию кишечной палочки на обез­зараженных объектах.
Бактериологический контроль обеззараживания кисточек для бритья. При бакте­риологическом анализе бритвенных кисточек после дезинфекции следует различать два момента: бактериологическое исследование новой бритвенной кисточки, не быв­шей еще в употреблении, и бактериологическое исследование кисточки для бритья, бывшей в употреблении.
1. Бактериологическое исследование новых бритвенных кисточек. Три — четыре кисточки после дезинфекции 4% формалином помещают в стерильные стаканы (каж­дую кисть отдельно) и заливают 0,25% раствором аммиака для нейтрализации форма­лина. Затем каждую кисточку переносят в отдельный стерильный стакан и заливают 50 мл стерильной водопроводной водой. Промывную воду по 0,1 мл засевают на 2 чашки Петри с агаром. На второй день после инкубации чашек с посевами в термоста­те определяют выросшую микрофлору; при подозрении выросших колоний на сибир­скую язву проводят полный бактериологический и биологический контроль.
2. Бактериологическое исследование кисточек, бывших в употреблении. После их обеззараживания проводят отбор для анализа непосредственно из ванн, бучильни- ка, центрифуги и из пакета при упаковке. Отобранные кисти не подвергают нейтрализа­ции, если их обеззараживали (дезинфицировали) горячен водой.
Посев промывной воды для каждой кисточки (0,1 мл) производят на поверхность агара и на поверхность среды Эндо в чашках Петри. Кисточки, не содержащие веге­тативной флоры, допускаются к употреблению. В противном случае их подвергают повторной дезинфекции.
Бактериологический контроль результатов дезинфекции при туберкулезе (в очаге). Лабораторный контроль качества дезинфекции при туберкулезе проводят при текущей и заключительной дезинфекции. Данный метод контроля может быть использован к очаге в целях определения обсемеяенносте предметов внешней среды бактериями туберкулеза.
При оценке эффективности обеззараживания при туберкулезе забранные пробы до и после (через 45—120 минут) проведения дезинфекции или только после дезинфек­ции доставляют в лабораторию в воздгожно короткий срок — не более чем через 2 часа.
Пробы берут путем протирания стерильным ватным тампоном, укрепленным на палочке, поверхностей тех предметов, которые находились в непосредственной близо­сти к больному туберкулезом. Перед употреблением тампон смачивают стерильным физиологическим раствором.
Пробы берут с плевательниц, с пола у постели больного, с пола в том месте, где обеззараживали мокроту, со спинки кровати больного, со стены у изголовья посте­ли больного, с посуды (3 предмета в одну пробу), мебели, книг и других вещей, которы­ми пользовался больной. В случае обеззараживания вещей (одеяла, подушки, ковра н т. д.) с них также берут пробы.
Пробы с предметов, обработанных хлорсодержащими препаратами, берут ватны­ми тампонами, смоченными стерильным 1% раствором гипосульфита.
Смывы с каждого объекта производят одним тампоном (всеми сторонами), поме­щают его в стерильную пробирку с пробкой (в которой он доставлялся в очаг). Про­бирки с тампонами устанавливают в специальный ящик с гнездами для них и крышкой.
На пробирке отмечают порядковый номер и под тем же номером заносят в список, предмет, с которого взята проба.
При сборе проб отмечают: адрес, фамилию, имя, отчество и возраст больного, диагноз и дату заболевания, дату и время проведения дезинфекции, расход дезинфи­цирующих средств и площадь пола обработанного помещения, санитарное состояние квартиры, производилась ли текущая дезинфекция, способы дезинфекции мокроты, белья, посуды (дезинфицирующим средством или кипячением), номер наряда, фамилии дезинструкторов бригады.
При текущей дезинфекции пробы забирают со следующих объектов: пола у кро­вати больного, пола в том месте, где обеззараживали мокроту, плевательницы и посуды больного.
Пробы берут так же, как и при контроле эффективности по поводу кишечных инфекций.
При контроле эффективности обеззараживания посуды последнюю тщательно протирают тампонами или салфетками (5x5 см), слегка смоченными в физиологическом растворе. Использованные тампоны и салфетки помещают В колбы с физиологическим раствором (10 мл на каждый тест) с бусами и доставляют в лабораторию.
Контроль обеззараживания поверхностей при туберкулезе. После окончания экспозиции поверхности (30x50 см) тщательно протирают стерильной увлажненной марлевой салфеткой в течение 2 минут. В целях контроля эффективности обеззаражи­вания используют также тест-объекты. Тесты из дерева, линолеума, а также окрашен­ные масляной краской, оклеенные обоями, оштукатуренные и т. д. размером 10х 10 см заражают мокротой (не гомогенизированной) из расчета 1 мл мокроты на 100 см². Равномерность нанесения достигают путем тщательного растирания мокроты стеклян­ным шпателем. Подсушивание производят при комнатной температуре в течение суток. Тесты развешивают на поверхностях, подлежащих обеззараживанию; после обезза раживания тесты доставляют в лабораторию, где их протирают тампонами.
Контроль обеззараживания мокроты. В случае определения эффективности дезинфекции мокроты после выдерживания заданной экспозиции и нейтрализации дезинфектанта (если имеется) доставляют в лабораторию.
Контроль эффективности камерного обеззараживания при туберкулезе. Эффективность камерного обеззараживания проверяют, используя мето­ды, аналогичные тем, которые применяют при других инфекциях с той лишь разницей, что, кроме золотистого стафилококка, используют также непатогенный кислотоупорный сапрофит «В-5». Последний по своей устойчивости несколько превосходит штамм микобактерий туберкулеза, он морфологически сходен с микобактериями туберкулеза, растет на тех же средах, но в значительно более короткие сроки. Выраженный рост отмечается на 3—4-й день.
Методы лабораторного анализа взятых проб. При исследовании соско- бов, смывов, а также жидкости, полученной после промывания тестов, тампо­нов и др., пользуются культуральным и биологическим методами.
а) Культуральный способ исследования. Ватную часть тампонов, до­ставленных в лабораторию, снимают стерильным пинцетом и погружают в широкие пробирки с 20 мл стерильного физиологического раствора с бусами, после чего их тщательно встряхивают в течение 10 минут.
Смыв сливают в стерильный узкогорлый пузырек, а тампон дополни­тельно промывают 20 мл физиологического раствора и смыв снова сливают в тот же пузырек. Тампон после отжатия пинцетом выбрасывают в бак для обеззараживания. В целях извлечения микроорганизмов жидкость центри­фугируют или используют метод флотации.
Метод флотации^[34]. К смывной жидкости добавляют 10 мл 0,5% №ОН; после встряхивания в течение 10 минут прибавляют несколько капель бен­зола или бензина и вновь встряхивают, после чего доливают до горлышка посуды стерильной водопроводной воды. Через 15—20 минут у горлышка
образуется сливкообразное флотационное кольцо, из которого производят посевы на различные питательные среды по 0,2 мл и заражение животных (морских свинок и белых мышей). При использовании метода флотации исключают прогревание на водяной бане (которое применяют в диагностиче­ских лабораториях), так как последнее может понизить жизнеспособность бактерий или привести их к гибели.
При сборе проб до дезинфекции необходимо флотационное кольцо отсосать, перенести в центрифужную пробирку и долить примерно равное количество 10% раствора серной кислоты; затем пробирку встряхивают 3—5 минут и оставляют до получения нового флотационного кольца, из которого производят посев и заражение животных.
Метод осадка. Омывную жидкость последовательно центрифуги­руют в одной центрифужной пробирке, без взмучивания осадка; после центрифугирования всю надосадочную жидкость, а также надосадочную- часть отмывной жидкости сливают, к осадку добавляют 8 мл 5% раствора серной кислоты. Осадок взбалтывают с серной кислотой и вновь центрифу­гируют. После дополнительной промывки стерильным физиологическим раствором осадка последний разбавляют физиологическим раствором и про­изводят посев на питательную среду.
При культуральном методе исследования центрифужный осадок (полу­ченный после центрифугирования жидкости, использованной для отделения снятых тампонами с поверхности бактерий) разбавляют физиологическим раствором и производят посевы на питательную среду Петраньяни, Соловь­ева или кровяную среду. Наблюдение за посевами продолжают в течение 2 месяцев, при этом наличие роста проверяют через каждые 3—4 дня.
Среда Соловьева в прописи Центрального дезинфекционного института. 1кг очищенного и мелко нарезанного картофеля заливают 3 л водопроводной воды и варят в тече­ние 2 часов на открытом огне. Полученный отвар (около 2 л) процежи­вают через 1 слой марли и к нему добавляют 0,5% глюкозы, 0,5% аспарагина и 0,03% однозамещенного фосфорнокислого натрия, затем при постоянном помешивании разливают в пробирки по 5 мл и стерилизуют в автоклаве при 0,5 атм (110°) в течение 20 минут. После стерилизации в пробирках образует­ся небольшой осадок, состоящий из крахмальных зерен.
Кровяная среда в прописи Центрального на­учно-исследовательского дезинфекционного ин­ститута. В стерильные пробирки с 3 мл 1 % раствора аспарагина добав­ляют стерильно перед посевом 1 мл человеческой крови. Добавление аспара­гина и фосфорнокислого натрия (однозамещенного) к последним двум средам ускоряет рост туберкулезных микобактерий. Использование их позволяет получать рост туберкулезных микобактерий в короткие сроки (10— 14 дней).
б) Биологический способ исследования. Заражают белых мышей весом 20 г или морских свинок весом 300—-350 г.
Биологический метод изучения на морских свинках более чувствителен, чем культуральный. Подкожно вводят 3 мл разведенного осадка или воды, в которой отмывали тест (как до дизинфекции, так и после нее) перед его посевом. При наличии бактерий туберкулеза морская свинка погибает через 2—3 месяца. При вскрытии обнаруживают типичные туберкулезные пора­жения разных органов. Заболевание туберкулезом морской свинки может быть установлено на 3—4-й неделе при помощи туберкулиновой реакции;, иногда на 4—10-й день можно отметить увеличение и уплотнение лимфати­ческих желез.
Биопроба может быть проведена и на белых мышах (вес 10—20 г), что укорачивает сроки наблюдения. Заражать мышей можно или внутривенно в хвостовую вену по 0,2—0,4 мл, или путем внутримозгового заражения (до 0,1 мл). Материалом каждого смыва заражают не менее 5 мышей.
Отдельные очаги туберкулеза появляются в организме на б—7-й день, а на 16—18-н день эгн очагн охватывают уже различные органы. Типичная картина заболевания развивается к 40—42-му дню. При таком способе зара­жения в большинстве случаев пораженными оказываются легкие.
На 7—8-й день забивают из каждой партии по 2 мыши и делают мазки из паренхиматозных органов легких, печени и селезенки для обнаружения в них туберкулезных -микобактерий. Оставшихся мышей убивают на 13— 14-й день и определяют степень поражения макро- и микроскопическими методами.
в) Оценка эффективности дезинфекции. Оценку результатов качества дезинфекции в очаге туберкулеза устанавливают по следующим показате­лям: удовлетворительной дезинфекцию считают при отсутствии роста мико­бактерий туберкулеза на питательных средах, отсутствие их при микро- скопировании паренхиматозных органов белых мышей и при отсутствии у мышей или морских свинок специфических поражений.
Неудовлетворительной оценка дезинфекции считается при обнаружении роста микобактерий туберкулеза хотя бы одной из засеянных пробирок или обнаружение микобактерий туберкулеза при микроскопировании паренхи­матозных органов экспериментальных животных.
Бактериологический контроль эффективности обеззараживания в дезинфекцион­ных камерах. Дезинфекционные камеры 2 раза в год проверяют в отношении эффек­тивности обеззараживания. Проверку производят путем определения температуры или при помощи тест-объектов, зараженных бактериальной культурой, или одновременно при помощи того и другого метода.
В камерах, в которых теплоносителем является движущийся воздух, при теп­ловом контроле определяют температуру перед входом его в камеру и по выходе из нее.
В камере для определения температуры размещают предварительно проверенные максимальные термометры в трех плоскостях: в верхней зоне, на уровне воротников развешиваемой одежды, в средней зоне (на уровне карманов) и в нижней зоне, соответ­ствующей положению полы верхией одежды, термометры размещают в пяти точках каждой плоскости (по углам и а центре).
В камерах с площадью пола более 2 м^а рекомендуется помещать по 9 термометров в каждой горизонтальной плоскости (всего 27 термометров).
В небольших камерах закладывают по три термометра в каждой горизонтальной плоскости — два по противоположным углам (по диагонали) и один в центре. При наличии верхней одежды термометры закладывают под воротники, в карманы и в полы.
При проверке бактерицидного эффекта в качестве эталона в отношении вегета­тивных форм микробов используют золотистый стафилококк. Эталоном для проверки эффективности обеззараживания вещей, зараженных споровыми формами, служит культура антракоида.
Бактериальные тесты закладывают в стерильные мешочки из хлопчатобумажной ткани (5x5 см). Каждый мешочек завертывают в стерильную бумагу и помещают в ящи­чек с крышкой, который закрывают и пломбируют, после чего направляют в помеще­ние, где находится камера. В камере тесты закладывают в вещи вместе с максимальны­ми термометрами. Часть из тестов может быть положена в пробирки и закрыта ватны­ми пробками. Бумагу, в которой находились бактериальные тесты, также закладывают в камеру. Контрольный тест размещают отдельно в более плотной бумаге. Часть тест­объектов остается для контроля и обработке не подвергается. После окончания испы­тания камеры мешочки с бактериальными тестами укладывают на бумагу, одновремен­но подвергавшуюся обеззараживанию в камере, завертывают и кладут в ящик, кото­рый доставляют в лабораторию для исследования. Тесты засевают в бульон. Вначале производят посев опытных, а затем контрольных тестов.
Инсектицидный эффект работы камер проверяют путем закладки в вещи биоло­гических тест-инсектов (вши и их яйца).
Методы учета микрофлоры воздуха при его обеззараживании. Вопросы дезинфекции воздуха до сих пор еще не разрешены. В целях обеззаражива­ния воздуха изучают бактерицидность ряда препаратов, которые вводят в воздух путем испарения или распыления. Находят себе применение и ультрафиолетовые лучи. Эффективность обеззараживания дезинфициру­ющими препаратами и ультрафиолетовыми лучами определяется по уменьше­нию числа микроорганизмов в 1 м³ воздуха. Средство считают эффективным, если через 10—15 минут количество микроорганизмов в воздухе снижается до 10% и ниже.
При изучении эффективности препарата в лабораторных условиях бульонную культуру (стафилококк или стрептококк) или смыв культуры с твердой питательной среды (последнюю разводят до 2 млрд.) распыляют в бокс из распылителя (компрессором, пылесосом) в количестве 0,2—0,5 мл на 1 м³ воздуха, после чего немедленно берут контрольную пробу воздуха и затем вводят в воздух изучаемый препарат. Пробы воздуха из бокса берут для определения уменьшения микрофлоры через 5—15—30—45 ми­нут после испарения или распыления препарата. В лабораторных условиях для учета микрофлоры воздуха пользуются жидкостным методом. Виру- лицидные свойства препаратов в отношении вируса гриппа определяют по снижению количества заболевших мышей.
В последнем случае мышей в клетках из сетки помещают в бокс через специальное отверстие в стенке бокса и сейчас же или через 10—30 минут после распыления вируса (эмульсии 1 : 10 из растертых легких белых мышей), испарения или распыления изучаемого препарата. Каждую из пар­тий держат в боксе в течение часа. Контролем служит аналогичный спе­циальный опыт, в котором в бокс вводят только вирус (без последующего введения препарата). Кроме того, дополнительным контролем может быть партия мышей, посаженная в бокс после распыления вируса до распы­ления дезинфектанта-. Наблюдение за подопытными и контрольными мыша­ми ведут в течение 2 недель. Эффективность определяют по разнице в гибели животных в опыте и контроле, а также по отсутствию поражений легких у мышей. Препарат считают эффективным, если в партии мышей, поса­женных через 10—30 минут после распыления дезинфектанта, отмечают 90—100% выживаемость животных и отсутствие поражений легких, а в кон­троле — 90—100% гибель.
При определении количества микроорганизмов в воздухе может быть использован один из существующих методов (см. том I).
Все применяемые методы для микробиологического исследования воздуха могут быть разделены на три группы: основанные на принципе седиментации, фильтрации и ударного действия воздушной струи. В настоя­щее время чаще всего используют последние. При изучении наружного воздуха целесообразно производить исследование одновременно двумя методами, дополняющими друг друга (осадочным и аппаратом Ю. А. Кро­това или методом мембранных фильтров).
Аппарат конструкции Кротова представляет собой цилиндр, закрывае­мый сверху съемной крышкой, под которой на столике, вращающемся от турбулентного потока воздуха, устанавливают чашку Петри с плотной питательной средой (рис. 92).
Фильтрационные методы исследования воздуха. Одним из простей­ших способов исследования воздуха является метод Дьяконова, который в различных модификациях используют в практических условиях. Способ основан на просасывании определенного объема воздуха через стерильную жидкость (физиологический раствор, бульон и др.). Практически это сво-
29 Заказ Хг 228
дится к тому, что воздух просасывают через один или два последовательно соединенных поглотителя (дрексель или специальные сосуды этого типа), содержащие по 15—30 мл жидкости. Пользуются также стеклянными поглотителями с боковыми вмятинами, через горловую часть которых пропущены две стеклянные трубки, припаянные к сосуду. Стеклянные трубки можно пропустить через резиновую пробку сосуда или большой пробирки. Воздух пропускают через эти трубки: приводящую, погружен­ную в жидкость, и отводящую, находящуюся выше уровня жидкости.
Просасывание воздуха производят с помощью электрического, водоструй ного насоса или путем использования 2-бутылей с тубусом, причем из одной вытекает вода в нижестоящую бутыль (рис. 93).
Лабораторный бактериологический контроль дезинфекции допол­няют химическим контролем анализа проб исходных дезинфицирующих веществ, а также приготовленных из них на местах работы растворов. В первом случае устанавливают количественное содержание действующего вещества, а во втором проверяют правильность приготовления рабочих растворов и содержание в них действующего вещества.
ЛИТЕРАТУРА
Автандилов М. О дезинфекции жилых помещений хлором. Дисс. СПб., 1885. Алексеева М. И. Бактерицидные свойства растворов и паров некоторых эфиров резорцина. Дисс. канд. М., 1954.
Анастасьев Н. М. О паровой и пароформаляновой дезинфекции пассажирского багажа в вагонах. СПб., 1915.
Бараненков М. А. Выживаемость листерий во внешней среде и разработка режимов дезинфекции помещений и кожсырья при дистерилезе. Автореф. дисс. канд. М.. 1963.
Бархов Г. Г. К вопросу о дезинфицирующих свойствах сулемы. Дисс. СГ16.. 1897.
Беньяминсон Е. С.,Амчнславский И. В. Дезинфекционная практика. М—Л.. 1951.
Беньяминсон Е. С. Организация и методика обеззараживания. М., 1952.
БерезнЯкова В. А. Устойчивость риккетсий сыпного тифа, крысиного тифа и Волынской лихорадки к дезинфекционным и дезинсекционным средствам. Автореф. дисс. канд. Пермь, 1952.
Бирон С. Пособие к практической дезинфекции при заразных болезнях. Пб., 1916.
Болдырев Т. Е., Окуневский ЯЛ. Практическое руководство по войско­вой дезинфекции. М.—Л., 1934.
Вашков В. И. Руководство по дезинфекции, дезинсекции и дератизация. М., 1952.
Вашков В. И. Дезинфекция, дезинсекция и дератизация. Руководство для врачей. М., 1956
Вашков В. И. Простейшие способы дезинфекции, дезинсекции и дератизации. М., 1960.
Вашков В. И. Методы исследования дезинфекционных, дезинсекционных и дера­тизационных препаратов. М., 1961.
Вашков В. И. и Гандельсман Б. И. Пособие для дезинфекторов. М., 1959.
Вашков В. И., И с т о м и н а Т. И., П о г о д и и а Л. Н. Справочник по дезин­фекции, дезинсекции и дератизации. М., ¡962.
Гамалея Н. Ф. Исследование о новом способе комбинированной дезинфекции Пб., 1914.
Гандельсман Б. И. Дезинфекционное дело. М., 1959.
Гордон Д. К вопросу о дезинфекции в деревне. Самара, 1906.
Дезинфекция, дезинсекция и дератизация. Организационно-методические матери­алы. Под ред. В. М. Жданова. М., 1955.
Д о б р о с л а в и н А. П. Курс военной гигиены. Т. 1—2. СПб., 1885.
Д о н и ч М В. Механизм действия дезинфекционных веществ на бактерии Днепро­петровск, 1939.
Емельянов И. Ф. Краткое пособие для дезинфекторов и дезинструкторов. М.. 1945.
Засуховский Н. М. Сравнительная оценка приборов для обеззараживания сточных вод кипячением. Дисс. СПб., 1912.
3 е м и т И. И. Сборник инструктивных указаний по организации дезинфекционных мероприятий при отдельных инфекционных заболеваниях. Рига, 1948.
Калугина Т. И.. Фунгицидные свойства некоторых химических средств. Дисс. канд. М., 1953.
К а р а ф ф а-К о р б у т К- В. Краткое руководство практической дезинфекции в условиях военного времени. Пг., 1916.
Комарова М. А. Исследование антимикробной активности высших растений и экспериментальное обоснование возможности их использов