В пособии представлены современные методы, применяемые в иммунологии и в самых разных областях биологии и медицины. Наряду с классическими методами выделения клеток иммунной системы, изучения их функциональной активности подробно освещены методы иммуноанализа, исследования экспрессии генов методом ПЦР, микрочипов, направленный мутагенез, гибридомная биотехнология и др. Представлен комплексный подход к оценке системы цитокинов — одной из важных регуляторных систем организма. Приведены основные принципы и этапы постановки методов, часть которых может быть воспроизведена в рамках практических занятий. Пособие хорошо иллюстрировано. Предназначено студентам врачебных и биологических специальностей медицинских вузов и университетов, а также ординаторам, аспирантам, врачам всех специальностей, специалистам, работающим в разных областях биологии и медицины. Издание рекомендовано для использования в преподавании в медицинских вузах Проблемной учебно-методической комиссией по иммунологии и аллергологии. Рекомендовано в печать Центральным координационно-методическим советом РГМУ.
-
- Лабораторная работа 1-1
- ГЛАВА 2 МЕТОДЫ РАЗДЕЛЕНИЯ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ
- 2.1. ВЫДЕЛЕНИЕ ЛЕЙКОЦИТОВ ВЫДЕЛЕНИЕ ЛЕЙКОЦИТОВ
- ВЫДЕЛЕНИЕ МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТОК
- Лабораторная работа 2-1
- ВЫДЕЛЕНИЕ МОНОЦИТОВ
- Лабораторная работа 2-2 Постановка метода Рекалде
- ВЫДЕЛЕНИЕ НЕЙТРОФИЛОВ
- АНАЛИТИЧЕСКАЯ И ПРЕПАРАТИВНАЯ ЦИТОФЛУОРИМЕТРИЯ
- Система сбора и обработки данных
- ИММУНОМАГНИТНАЯ СЕПАРАЦИЯ КЛЕТОК
-
- ОЦЕНКА ПРОЛИФЕРАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ ЛИМФОЦИТОВ
- ОЦЕНКА КЛЕТОЧНОЙ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ
- Лабораторная работа 3-1
- Определение перфорина методом ELISPOT
- Связывание с тетрамерными структурами МНС класса I
- Определение каспаз методом проточной цитофлуорометрии
- Определение цитотоксической активности NK-клеток
- Лабораторная работа 3-2
- Оценка функциональной активности NK-клеток с использованием проточной цитометрии
- Комплементзависимая цитотоксичность
- ОЦЕНКА ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ФАГОЦИТОВ
- Лабораторная работа 3-3 Определение фагоцитарной активности нейтрофилов и макрофагов
- Лабораторная работа 3-4 Оценка фагоцитарной активности лейкоцитов человека
- Метод оценки хемотаксиса нейтрофилов с использованием камеры Бойдена
- Особенности постановки методов оценки хемотаксиса in vitro
- Лабораторная работа 3-5 Получение супернатанта, содержащего цитокины и другие биологически активные молекулы из моноцитов периферической крови человека
- Определение выработки активных форм кислорода и оксида азота
- Описание метода люминолзависимой хемилюминесценции
- Определение содержания NO в супернатантах культуры фагоцитов in vitro
- Оценка киллинга фагоцитов
- Определение активности миелопероксидазы в лейкоцитах периферической крови
- Количественная оценка антителообразующих клеток (метод Йерне)
- Постановка реакции выявления АОК (метод Н. Йерне)
-
- Встречная иммунодиффузия по Оухтерлони и Элеку
- Радиальная иммунодиффузия по Манчини
- Лабораторная работа 4-1 Определение уровня IgM, IgA и IgG в сыворотке человека методом радиальной иммунодиффузии
- ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ И РАДИОИММУННЫЙ АНАЛИЗЫ
- «Сэндвич»-ИФА
- Иммунометрический анализ
- Непрямые иммуноанализы
- Лабораторная работа 4-2 Твердофазный непрямой иммуноферментный анализ
-
- 6.1. ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ
- Денатурация ДНК-матрицы
- Стадия отжига праймеров.
- Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени
- Альтернативные ПЦР-методы амплификации нуклеиновых кислот
- Преимущества РЦР перед другими методами
- ИССЛЕДОВАНИЕ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ МЕТОДОМ МИКРОЧИПОВ
- ПОЛУЧЕНИЕ МЫШЕЙ С НОКАУТОМ (KNOCK-OUT) И НОКИНОМ (KNOCKIN) ГЕНОВ - МЕТОД НАПРАВЛЕННОГО МУТАГЕНЕЗА
- ПРИМЕНЕНИЕ РЕГУЛЯТОРНЫХ МИКРО-РНК В ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ
- MiRNA-146
- MiRNA-155
- MiRNA-223 — регулятор пролиферации и активации нейтрофилов
- ГЛАВА 7 МЕТОДЫ ОЦЕНКИ СИСТЕМЫ ЦИТОКИНОВ
- Клетки-продуценты цитокинов
- Клетки-мишени
- Лабораторная работа 7-2 Определение активности интерферона
- Лабораторная работа 7-3 Определение МИФ-активности