Спектроскопические методы


Исследования спектров поглощения света растворами органических веществ и срезами атеросклеротической фиброзной бляшки необходимы были для того, чтобы определить, какие липидные компоненты в пораженной атеросклерозом аорте распадаются под действием лазерного излучения и какие фрагменты являются результатом этого распада. Также проводилась регистрация сигналов флюоресценции и рассеяния от среза атеросклеротической фиброзной бляшки под действием ультрафиолетового лазерного облучения по оригинальной методике.
Для изучения интенсивности сигналов флюоресценции аорты поддействием лазерного излучения готовились микротомные срезы толщиной 25 мкм с атероматозной бляшки, из липидного слоя. Они помещались на кварцевое стекло и подвергались лазерному облучению на воздухе в вертикальном положении. Схема установки для облучения образцов с регистрацией сигналов флюоресценции и рассеяния представлена на рисунке 2.12. Сигналы флюоресценции от тонких срезов регистрировались фотодиодом ФЭК-22, перед которым располагался фильтр СЗС- 23, пропускающий свет с длиной волн 400-600 нм. Сигнал от фотодиода поступал на осциллограф С8-14, на экране которого

Рис. 2.12. Схема установки для облучения образцов с регистрацией сигналов флюоресценции и рассеяния:
1 — облучаемый образец; 2 — световые фильтры; 3 — фотодиод; 4 — осциллограф; А — падающий на образец лазерный свет; Б — отраженный или испускаемый образцом свет
регистрировались амплитуда и форма импульса. Сигнал рассеянного излучения регистрировался по той же методике, но с использованием фильтра УФС-5, который имеет максимум пропускания на длине волны 310 нм. Регистрировалась флюоресценция при каждом падающем на срез импульсе лазера, и сравнивались амплитуды сигнала флюоресценции, полученного от первого, 50, 100, и 200-го импульсов.
Спектры пропускания растворов до и после облучения лазерным лучом измерялись на спектрофотометре СФ-46 в диапазоне длин волн 0,2-1 мкм. Объектами исследования служили растворы холестерина в зтаноле с концентрацией 1 мг/мл, глицина в дистиллированной воде с концентрацией 200 мг/мл, глюкозы в дистиллированной воде с концентрацией 350 мг/мл и липидных экстрактов, полученных из атеросклеротической фиброзной бляшки в хлороформ-метаноловой смеси, помещаемые в кварцевые кюветы. Сначала измерялся спектр пропускания, затем кюветы с растворами облучались лазерным лучом, после чего снова регистрировались спектры пропускания. Растворы фотометрировались в ближней ультрафиолетовой области (0,2-1 мкм). Спектры поглощения этих растворов рассчитывались исходя из спектров пропускания без учета рассеяния и отражения для растворов. 

Источник: В.М. Шипулин, С.Л. Андреев, Е.Н. Павлюкова, «Использование лазеров в сердечно-сосудистой хирургии: от эксперимента к практике» 2010

А так же в разделе «Спектроскопические методы »