Биоимпедансометрию осуществляли с помощью анализатора структуры тела и параметров гемодинамики фирмы ДИАМАНТ-АИСТ (Санкт-Петербург). Методика биоимпедансного анализа структуры тела заключается в измерении сопротивления (импеданса) собственных тканей организма или жидкостей до и после воздействия переменным током с различной частотой. Структура тела оценивалась по следующим параметрам: жировая масса тела (ЖМ), безжировая масса тела (БЖМ), в состав которой входит объем общей воды, «тощая» масса и сухая клеточная масса. Использовали общепринятые должные значения процентного содержания жира в организме и безжировой массы тела (таблица 7).
Таблица 7 - Должные значения показателей структуры тела организма
Показатель Должные значения
Процентное содержание жира в организме (ЖМ), %
- мужчины 15-25
- женщины 18-30
Безжировая масса тела (БЖМ), кг
- мужчины 55-80
- женщины 40-70




Фиброгастродуоденоскопия (ФГДС) проводилась к.м.н. И.А. Лоевой в эндоскопическом отделении клиники пропедевтики внутренних болезней СЗГМУ имени И.И. Мечникова. Исследование проводилось всем пациентам для оценки состояния слизистой оболочки пищевода, желудка и двенадцатиперстной кишки (ДПК), косвенно оценивались моторная и секреторная функция желудка. Применялись гибкие эндоскопы фирмы «Olympus» модели GIF-Q-160 (Япония). При эндоскопическом исследовании выполнялась прицельная биопсия слизистой оболочки ретробульбарного отдела ДПК. Материал фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина в течение 12-24 часов, заливали в парафин по общепринятой методике для последующего гистологического и морфометрического анализа.
Всем больным проводилось исследование биопсийного материала слизистой оболочки антрального отдела желудка на уреазную активность Helicobacter pylori (Н.р.). Биоптаты слизистой оболочки желудка сразу помещались на диск HelPil-test (фирмы «Sintana SM»). Результаты исследования оценивались через три минуты. Тест считался положительным при изменении цвета диска с желтого на зеленый и свидетельствовал об инфицировании слизистой оболочки желудка H.p.
Во время ФГДС для оценки кислотообразующей функции желудка у больных применялась методика хромогастроскопии с раствором конго красного красителя. Желудок через зонд промывали 500 мл 5 % раствора бикарбоната натрия и вводили 30 мл 0,3 % раствора конго красного красителя. Больной менял положение тела для лучшего контакта красителя с поверхностью желудка. Участки, вырабатывающие соляную кислоту, становились темными, а лишенные кислоты - оставались красными. Результаты исследования оценивали через пять минут после начала воздействия красителем конго красным. При гиперхлоргидрии в темный цвет окрашивался кардиальный отдел желудка, тело желудка, антральный отдел желудка, при нормохлоргидрии - тело желудка и антральный отдел, при гипохлоргидрии - только тело желудка, при ахлоргидрии - слизистая оболочка желудка во всех отделах сохраняла красный цвет.
Ультрасонографическое исследование проводили на аппарате «Sonoline Prima LC» фирмы «Сименс» (Германия), работающем в масштабе реального времени, с использованием секторных и линейных датчиков
2,5 МГц и 7,5 МГц по стандартной методике [Мухарлямов Н.М., 1987]. При данном исследовании проводили оценку размеров, структуры, наличия ультразвуковых признаков изменений печени, желчного пузыря, поджелудочной железы, селезенки.
Гистологические и морфометрические исследования проводились на кафедре патологической анатомии СЗГМУ имени И.И. Мечникова. Материал фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина в течение 12-24 часов, заливали в парафин по общепринятой методике под контролем правильности ориентации биоптата для исключения возможности поперечных и тангенциальных срезов. Изготавливали серийные парафиновые срезы (от 20 до 30 с каждого биоптата) толщиной 3-5 мкм. Гистологические срезы окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по Ван-Гизону, альциановым синим при рН=1,0; толуидиновым синим. Проводили реакцию ШИК, окраску по Романовскому-Гимзе. Для исследований использовали микроскоп «Микромед-1» (Россия), окулярный микрометр «Reichert» (Австрия) с комбинированной окулярной стереометрической сеткой, а также демонстрационную насадку к микроскопу «Ампливал» (Россия) со стандартной масштабной сеткой по методике Б.С. Сережина (1993). Микрофотографирование гистологических препаратов выполняли цифровой фотокамерой «Nikon» (Япония).
При гистологическом исследовании признаки хронического дуоденита оценивали по двум классификациям. По классификации R. Whitehead (1990) определяли степени выраженности хронического дуоденита: I степень (слабая) - относительная сохранность структуры слизистых оболочек и поверхностного эпителия ДПК, увеличение количества межэпителиальных лимфоцитов, лимфоцитов и плазмоцитов в собственной пластинке; II степень (умеренная) - повреждение поверхностного эпителия, деформация и укорочение ворсинок, преобладание в воспалительном инфильтрате лимфоцитов; III степень (тяжелая) - выраженное укорочение ворсинок, углубление крипт, эрозии, уменьшение количества бокаловидных клеток, выраженная лимфоплазмоцитарная инфильтрация. О степени активности течения хронического дуоденита судили по наличию и степени выраженности расстройств кровообращения и инфильтрации эпителия и собственной пластинки слизистой оболочки полиморфноядерными лейкоцитами [Конорев М.Р. и др., 2003]. Слабую степень активности диагностировали при небольшом количестве нейтрофилов без лейкопедеза в области ямок и апикальной части валиков; умеренную - при умеренном количестве нейтрофилов с умеренным лейкопедезом в области ямок и валиков; выраженную - при обилии нейтрофилов с резко выраженным лейкопедезом и скоплением лейкоцитов с образованием «внутриямочных абсцессов».
Согласно классификации M.N. Marsh (1992) выделяли 4 стадии морфологических изменений слизистой оболочки ДПК: 1-я стадия - инфильтративная (лимфоцитарная инфильтрация эпителия при нормальной архитектонике слизистой оболочки); 2-я стадия - гиперпластическая (лимфоцитарная инфильтрация слизистой оболочки и углубление крипт); 3-я стадия - деструктивная (резкое укорочение ворсинок и углубление крипт, эрозии, уменьшение количества бокаловидных клеток, обильная лимфоплазмоцитарная инфильтрация собственной пластинки и покровного эпителия (3А - порциальная атрофия ворсинок, 3В - субтотальная, 3С - тотальная); 4-я стадия - гипопластическая (тотальная атрофия ворсинок и гипоплазия крипт).
Полуколичественно по бальной системе оценивали характер фиброза (очаговый, диффузный) и степень выраженности диффузного фиброза (слабая, умеренная, выраженная); нарушения кровообращения (отек стромы и полнокровие сосудов - нет/есть); наличие бруннеровых желез в собственной пластинке слизистых оболочек (наличие в постбульбарном отделе расценивали как гиперплазию).
При гистологическом исследовании и морфометрических подсчетах были расчитаны (в мкм):
- толщина слизистой оболочки (от собственной мышечной пластинки слизистой оболочки до верхнего края клеток всасывательного эпителия верхушек ворсинок);
- длина ворсинки (от ее основания до верхнего края);
- максимальная толщина ворсинки (по верхним краям эпителиоцитов боковых поверхностей ворсинки);
- глубина крипты (от наружного края устья, до ее дна - по базальной мембране);
- ширина крипты (по верхним краям эпителиоцитов).
Указанные измерения проводили в нескольких местах (от 5 до 15, в среднем 6-7 участках), определяли максимальные и минимальные параметры
с последующим вычислением средних величин. В собственной пластинке в нескольких местах по стандартной площадке (морфометрический квадрат с «опорными» точками) подсчитывали количество лимфоцитов, плазматических клеток, эозинофильных лейкоцитов, нейтрофильных лейкоцитов, клеток стромы (фибробластов и фиброцитов) с последующим вычислением средних показателей и пересчетом определяемых величин на стандартную площадь, равную 1 мм . Количество межэпителильных лимфоцитов (МЭЛ) среди клеток покровного эпителия ворсинок и отдельно среди эпителиоцитов крипт расчитывали на различном протяжении их поверхности с пересчетом на 100 клеток. При анализе полученных данных использовали морфометрические показатели слизистой оболочки ДПК здоровых добровольцев, представленные в таблице 8.
Таблица 8 -П оказатели слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки здоровых обследованных (Калинина Е.Ю., 2005)
Показатель Значения
Толщина слизистой оболочки, мкм (M±g) 581,6±21,3
Высота ворсинки, мкм (M±g) 446,0±17,6
Толщина ворсинки, мкм (M±g) 126±4,7
Глубина крипты, мкм (M±g) 109,4+1,0
Ширина крипты, мкм (M±g) 48,18±0,86
Лимфоциты, % от клеточной плотности 3,83±0,15
Плазмоциты, % от клеточной плотности 5,25±0,25
Эозинофилы, % от клеточной плотности 1,11±0,15
Нейтрофилы, % от клеточной плотности 1,06±0,10
Количество бокаловидных клеток (на 100 энтероцитов) 24,36±0,21
Межэпителиальные лимфоциты ворсинок, на 100 энтероцитов (M±g) 10,75,98+0,25



Исследование функции внешнего дыхания (ФВД) с целью изучения функционального состояния бронхолегочной системы выполнено больным муковисцидозом в лаборатории НИИ пульмонологии СПб ГМУ им. Акаде­мика И.П. Павлова с помощью спирографа Master Screen (фирма Erich Jager, Г ермания), позволяющего регистрировать спирографическую кривую спокойного дыхания и отношение кривой «поток-объем» форсированного выдоха. Перед исследованием проводились необходимые
антропометрические измерения. Индивидуальная оценка полученных объемных и скоростных показателей выражалась в процентах к должным величинам, рассчитанным с учетом возраста, пола, роста и веса больного.
Всем больным муковисцидозом выполнена компьютерная томография органов грудной клетки в лаборатории рентгенологии НИИ пульмонологии СПб ГМУ им. академика И.П. Павлова.