ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУПП КРОВИ ПО СТАНДАРТНЫМ ИЗОГЕМАГГЛЮТИНИРУЮЩИМ СЫВОРОТКАМ И СТАНДАРТНЫМ ЭРИТРОЦИТАМ (ПЕРЕКРЕСТНЫЙ СПОСОБ)
Способ наиболее часто используется в серологических лабораториях. Суть метода состоит в определении наличия или отсутствия в исследуемой крови групповых антигенов А и В с помощью стандартных изо- гемагглютинирующих сывороток, а также групповых антител а и Р с помощью стандартных эритроцитов. Это дает полную серологическую характеристику крови.
Реакция со стандартными эритроцитами проводится следующим образом.
а) Необходимое оснащение
- Оснащение для реакции со стандартными эритроцитами отличается тем, что для реакции агглютинации необходимы стандартные эритроциты трех групп крови: 0(1), А(Н), В(Ш).
- Стандартные эритроциты приготавливают из крови доноров с заранее известной группой крови, хранят при 4-8°С. Срок годности 2-3 дня.
б) Техника проведения реакции
- Кровь для исследования берут из вены в сухую п робирку, центрифугируют или оставляют в покое на 20-30 минут для разделения на сыворотку и эритроциты.
- На маркированную тарелку пипеткой в шесть ячеек наносят по одной большой капле сыворотки исследуемой крови из пробирки (0,1мл), а рядом с ними — по одной маленькой капле (0,01мл) стандартных эритроцитов групп 0(1), А(Н), В(Ш) (по две серии).
- Дальнейшие мероприятия проводятся аналогично методу с использованием стандартных изогемагглютинирующих сывороток: соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют изотонический раствор хлорида натрия, после чего оценивают результат.
Реакция со стандартными сыворотками проводится описанным выше способом параллельно с реакцией со стандартными эритроцитами.
в) Трактовка результатов
При трактовке результатов оценивают данные, полученные при обеих реакциях (со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами (табл. 6.3).
Особенностью трактовки результатов реакции со стандартными эритроцитами является то, что эритроциты группы 0(1) являются контрольными (в них нет антигенов, что делает принципиально невозможной специфическую реакцию агглютинации с любой сывороткой).
Таблица 6.3
Оценка результатов определения группы крови перекрестным способом
Наличие агглютинации при реакции со стандартными изогемагглютипирующими сыворотками следующих гру n п |
Наличие агглютинации при реакции со стандартными эритроцитами следующих групп 9 |
Группа крови |
||||
0(1) |
А(П) |
В(Ш) |
AB(1V) |
0(1) |
А(11) ВЦП) |
|
— |
— |
— |
|
— |
+ + |
Оар(1) |
+ |
— |
+ |
|
— |
—¦ 1 -\- 1 |
Ар(И) |
+ |
+ |
— |
|
— |
+ 1 ” |
Ви(Ш) |
+ |
+ |
+ |
— |
|
¦ _ | _ |
AB0(IV) |
+ — агглютинация - — агглютинация отсутствует
Результат перекрестного способа считается достоверным только если при оценке результатов реакции со стандартными изогемагглютиниру- ющими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают. Если этого не происходит, обе реакции следует переделать.
- ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУПП КРОВИ МОНОКЛОНАЛЬНЫМИ АНТИТЕЛАМИ
а) Необходимое оснащение
Для определения группы крови используются моноклональные антитела, для получения которых применяется гибридомная биотехнология.
Гибридома — это клеточный гибрид, образованный путем слияния клетки опухоли костного мозга (миеломы) с иммунным лимфоцитом, синтезирующим специфические моноклональные антитела. Гибридома приобретает свойства обоих «родителей»: способность к неограниченному росту, характерную для опухолевой клетки, и возможность синтезировать антитела, присущую иммунному лимфоциту.
Разработаны стандартные реагенты — моноклональные антитела (МКА): цоликлоны анти-А и анти-В, которые применяют для определения агглютиногенов эритроцитов. Цоликлоны представляют из себя ли- офилизированный порошок красного (анти-А) или синего (анти-В) цвета, который разводят изотоническим раствором хлористого натрия непосредственно перед исследованием.
Таблица 6.4
Схема оценки результатов определения групп крови с помощью моноклональных антител (цоликлоны анти-А и анти-В)
Наличие агглютинации при реакции с цоликлоном |
-1 Группа крови |
|
анти-А |
анти-В |
|
|
— |
ОаР (I) |
1 + |
— |
Ар (II) |
|
+ |
ва (III) |
+ ¦ |
+ |
AB„ (IV) |
в) Трактовка результатов
Оценка результатов очень проста (табл. 6.4 ).
Методика определения группы крови с помощью цоликлонов позволяет отказаться от услуг доноров, кровь которых используют для приготовления стандартных изогемагглютинирующих сывороток.
Источник: Петров Сергей Викторович, «Общая хирургия » 1999
А так же в разделе «ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУПП КРОВИ ПО СТАНДАРТНЫМ ИЗОГЕМАГГЛЮТИНИРУЮЩИМ СЫВОРОТКАМ И СТАНДАРТНЫМ ЭРИТРОЦИТАМ (ПЕРЕКРЕСТНЫЙ СПОСОБ) »
- ОБЩИЕ ВОПРОСЫ ТРАНСФУЗИОЛОГИИ
- ДОНОРСТВО В РОССИИ
- ОСНОВНЫЕ АНТИГЕННЫЕ СИСТЕМЫ КРОВИ
- МЕХАНИЗМ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ «АНТИГЕН — АНТИТЕЛО»
- ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУППЫ КРОВИ ПО СИСТЕМЕ АВОГРУППЫ КРОВИ ПО СИСТЕМЕ АВО
- МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГРУПП КРОВИ
- ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУПП КРрВИ ПО СТАНДАРТНЫМ ИЗОГЕМАГГЛЮТИНИРУЮЩИМ СЫВОРОТКАМ
- ВОЗМОЖНЫЕ ОШИБКИ
- ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС-ФАКТОРААНТИГЕННАЯ СИСТЕМА РЕЗУС-ФАКТОРА
- СПОСОБЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕЗУС-ФАКТОРА
- КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ГРУППОВОЙ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИОБЩИЕ ИММУНОГЕНЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ
- ЗНАЧЕНИЕ ГРУППОВОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ ПРИ ГЕМОТРАНСФУЗИИ
- ОСОБЕННОСТЬ СОВМЕСТИМОСТИ ПО РЕЗУС-ФАКТОРУ
- ПЕРЕЛИВАНИЕ КРОВИ И ЕЕ КОМПОНЕНТОВ
- СПОСОБЫ ПЕРЕЛИВАНИЯ КРОВИ
- ТЕХНИКА ГЕМОТРАНСФУЗИИ
- КОМПОНЕНТЫ И ПРЕПАРАТЫ КРОВИ
- ПОНЯТИЕ О КОМПОНЕНТНОЙ ГЕМОТРАНСФУЗИОННОЙ ТЕРАПИИ
- КРОВЕЗАМЕЩАЮЩИЕ РАСТВОРЫ
- ДЕЗИНТОКСИКАЦИОННЫЕ РАСТВОРЫ
- КРОВЕЗАМЕНИТЕЛИ ДЛЯ ПАРЕНТЕРАЛЬНОГО ПИТАНИЯ
- РЕГУЛЯТОРЫ В0ДН0-С0ЛЕВ0Г0 ОБМЕНА И КИСЛОТНО-ЩЕЛОЧНОГО СОСТОЯНИЯ
- ОСЛОЖНЕНИЯ ПЕРЕЛИВАНИЯ КРОВИ
- 2. ОСЛОЖНЕНИЯ РЕАКТИВНОГО ХАРАКТЕРА
- ГЕМОТРАНСФУЗИОННЫЕ ОСЛОЖНЕНИЯ
- Глава 7 ОСНОВЫ АНЕСТЕЗИОЛОГИИ
- ОСНОВНЫЕ ВИДЫ ОБЕЗБОЛИВАНИЯ
- ПОДГОТОВКА К АНЕСТЕЗИИ (ПРЕМЕДИКАЦИЯ)
- ОБЩЕЕ ОБЕЗБОЛИВАНИЕ
- КЛАССИФИКАЦИИ НАРКОЗА
- ИНГАЛЯЦИОННЫЙ НАРКОЗ
- ВИДЫ ИНГАЛЯЦИОННОГО НАРКОЗА
- ВНУТРИВЕННАЯ АНЕСТЕЗИЯ
- МИОРЕЛАКСАНТЫ
- СОВРЕМЕННЫЙ КОМБИНИРОВАННЫЙ ИНТУБАЦИОННЫЙ НАРКОЗ
- МЕСТНАЯ АНЕСТЕЗИЯ
- ИНФИЛЬТРАЦИОННАЯ АНЕСТЕЗИЯ
- ЭПИДУРАЛЬНАЯ И СПИННОМОЗГОВАЯ АНЕСТЕЗИЯ
- НОВОКАИНОВЫЕ БЛОКАДЫ
- ВЫБОР СПОСОБА ОБЕЗБОЛИВАНИЯ
- ВЗАИМООТНОШЕНИЯ ХИРУРГ — АНЕСТЕЗИОЛОГ