предыдущая
к содержанию
следующая

Приложение 16 Методы забора и бактериологического исследования материала при инфекционных заболеваниях

Болезнь Материал
для
исследова
ния		 Способ отбора проб На
какой день от начала заболева ния		 Способы
исследования		 Время
получени
я
результат
ов		 Примечание
1 2 3 4 5 6 7
Боту­
лизм		 Рвотные массы (50-100 г), промывн ые воды желудка, кал (100­200 г), ос­татки пи­щевых продукто в (консер­вы, кол­басы, кра­сная рыба - около 100-200г). Каждый из
указанных
видов
материала
собирают в
стерильные
банки,
закрывающи
еся
резиновыми
или
корковыми
пробками.		 С начала заболева ния. Исследования ве­дут в двух направ­лениях:
1. определяют на­личие ботулини- ческих токсинов.
2.Определяют возбудителей ботулизма. Обнаружение ботулинических токсинов. Промывные воды - при наличии в них комочков, по­следние растира­ют в стерильной ступке.
Кал (10-15 г) - растирают с двой­ным количеством физиологического раствора.
Рвотные массы растирают с фи­зиологическим раствором в сте­рильной ступке. Пищевые продук­ты (25-30 г) рас­тирают в стериль­ной ступке с фи­зиологическим		 От 1 до 4 дней. Каждую из отобранных проб собирают в отдельную банку. Банки нумеруют, наклеивают этикетки (вид материала, от кого взят, дата сбора
материала).
Банки
опечатывают и
тщательно
упаковывают.
Хранить
материал
следует на
холоду, т. к.
при комнатной
температуре
ботулинически
й токсин
быстро
разрушается.

8-10 мл из То же. раствором. В за- висимсти от плот­ности продукта берут равное или двойное количест­во физиологиче­ского раствора. После растирания пробы выдержи­вают 1-1,5 часа при комнатной температуре для экстрагирования токсина. Фильтру­ют через ватно­марлевый фильтр или центрифуги­руют.
Центрифугат каж-
вены дой пробы крови
помещают в (сыворотку или
стерильную цитратную кровь)
пробирку делят на две час-
(берут до ти: 2/3 объема ис-
введения пользуют для об-
больному наружения боту-
лечебной линических ток-
сыворотки). синов; 0,8-1,0 мл
Кровь этого материала
можно вводят внутривен-
смешивать но или внутри-
также с 4% брюшинно белым
раствором мышам. Цитрат-
лимоннокис ную кровь вводят
лого натрия только внутри-
в брюшинно. Для
соотношени определения вида
и 3:1. токсина ставят ре-
акцию нейтрали­зации.
После - оставшу­юся 1/3 растертых проб используют для выделения бо- тулинических ми­кробов. Посевы производят на следующие смы-
Кровь.

Через 3-4 дня.

вы: казеиново­грибную среду, среда Тароцци, бульон Хотинге- ра, пепсин, пеп- тонный бульон с 0,5% глюкозой (в мясных средах обязательно нали­чие мясного или печеночного фар­ша). Перед посе­вом среды нагре­вают на кипящей водяной бане, ох­лаждают и про­изводят посев; за­тем заливают сло­ем вазелинового масла толщиной 1 см.
Микроскопия - мазки из вырос­шей культуры. Окраска специи- альная для анаэ­робов и по Граму.
Брюш- Кровь 5-10 мл - С мо- Посев - на 10-20 6-10 дней. Посев лучше
ной (ранняя первые мента % желчный буль- производить у
тиф, диагности болезни заболева он или среду Рап- постели
паратиф ка). 15-20 мл - ния и в попорта. больного.
А и В на поздних течение Бактериологиче-
сроках (2-3 всего ское исследование
недели). лихорад крови методом ге-
очного мокультуры ср.
периода. Раппопорта.
Кал и 3-5 г испраж- То же и Посев - на среды 4-5-й Посев по воз-
моча. нений поме- на про- Эндо, Левина, день. можности пов-
щают в сте- тяжении Плоскирева, торяют 2-3 ра-
рильную ба- всей бо- Раппопорта (в за, это повы-
ночку сухую лезни и чашках петри) и шает количе-
либо с гли- в период на среды накоп- ство положи-
цериновой реконва ления (Кауфмана, тельных нахо-
смесью (со- лисценц Мюллера, док.
отношение ии. магниевая,
1:3); 50-100 селенитовая) с
мл мочи со- последующим
бирают в пересевом на

банку, цент- среду
рифугируют; висмутсульфат
для посева
используют
осадок.		 агаром.
Дуоде- В С Посев - на среды 4-5-й Можно
нальное стерильные момента Эндо, Левина, день. производить
содержи- пробирки заболева Плоскирева и на посев из смеси
мое. собирают ния и в среды накопления трех порций.
порции А, В, течение (Кауфмана, Мюл-
С. всего лера, селенитовая)
лихорад с последующим
очного пересевом на
периода. среду висмут­сульфат агаром.
Кровь 1-2 мл берут С пер- Исследование На Реакция
из пальца в вых серологическое - следующ Видаля счи-
стерильную дней бо- пробирку с кро- ий день. тается поло-
пробирку. лезни с вью помещают в жительной на-
обяза- термостат на 1 -2 чиная с разве-
тельным часа для сверты- дения 1:200.
повторн вания, затем ста- Гемагглютина
ым ис- вят на холод. ция - с
следова Отсасывают сыво- разведения
нием - ротку и ставят 1:50. Для
через 7- реакцию агглюти- выявления
10 дней нации Видаля и нарастания
для ус- реакцию непря- титра реакции
тановле мой гемаглюти- повторяют 2-3
ния ди- нации (РНГА). раза с
намики РПГА применяют интервалом в
нараста- эритроцитарные 3-4 дня.
ния спе- О-Н и VI, а для
цифичес паратифов - груп-
ких повые А и В-
антител. сальмонеллезные
диагностикумы.
Кровь. 10 мл берут С Посев - на среду, Через 35-
из вены момента состоящую из 40 дней.
стерильным заболева скошенного агара
шприцем до ния и в (50 мл) и
начала течение печеночного или
лечения всего мясного
антибиотика лихорад пептонного б-на
ми. очного (25-30 мл).
Засевают по периода,
5 мл в 2 а также
флакона со _у_______
Бруцел­
лез

средой.
хрониче
ски
больных в период обостре ния.
То же.
Собирают в стерильную посуду. Мо­чу и взвесь испражне­ний центри­фугируют, для посева используют осадок.
3-5 мл берут из вены в стерильную пробирку.
Моча,
кал,
изпунктат
а
костного
мозга,
лимфатич
еских
узлов.
Кровь.
Посев - на те же среды.
Через 20­25 дней.
С 8-9 дня
болезни.
Серологические реакции - реакция Хеддльсона, реакция Райта, РПГА.
По реак­ции Хед- дельсона в тот же день, по реакции Райта на следующ ий день, по РПГА через 2 часа.
Аллергическая проба - ставят внутрикожную пробу Бюрне: в
область средней трети предплечья вводят 0,1 мл бру- целлина (пользу­ются туберкули­новым шприцем)._
Микроспория - В тот же окраска по день.
Романовскому и по Граму.
Положительна я реакция ха­рактеризуется гиперемией и отечностью на месте введения.
То же.
Возврат ный тиф
На предмет­ное стекло наносят 2 капли крови, осторожно размазывают , чтобы по­лучилась толстая кап­ля.
Во врмя
приступ
а, лучше
на высте
лихорад
очного
периода.
Кровь.

Грипп. Вирусы гриппа и пара­грипп­озных заболе­ваний Слизь из зева и носа.
Кровь.
Кровь.		 Берут двумя стерильным и тампона­ми. Каждый тампон по­мещают в 1 мл среды Хенек с до­бавлением 2% сыворот­ки и 100 ЕД антибиотико в (пеницил­лин плюс стрептомици н). Получен­ную жид­кость цент­рифугируют. 5-8 мл берут стерильно из локтевой вены.
Повторно.		 С начала заболева ния.
Не
позднее 5 дня.
На 12-14 день.		 Заражают тканевую культуру (11-12­дневные куриные эмбрионы).
Серологические исследования - кровь берут дву­кратно в начале заболевания и в период выздоров­ления.
Ставят реакцию торможения гем- агглютинации и реакцию связыва­ния комплемента. Парные сыворот­ки исследуют для определения нара­стания антител.		 Через 10­12 дней.
На
следующ ий день.
Газовая Экссудат. Плотные С начала Микроспория - из В тот же
гангре- Кусочки части заболева всех отобранных день.
на измененн материала ния. проб готовят
ой ткани собирают мазки. Окраска по
из раны пинцетом, Граму.
больного. жидкие - Посев - плотные Через 8-
пипеткой. части измельчают, 10 дней.
Собранный растирают в ступ-
материал ке с песком в рав-
помещают в ном объеме физи-
стерильную, ологического рас-
герметическ твора. Взвесь ис-
и следуемого мате-

закрывающу
юся
стеклянную посуду и немедленно пересылают в
бактериолог
ическую
лаборатори
ю.		 риала засевают на кровяной агар, среду Вильсон- Блэр, молоко, среду Тароцци. Кровь и экссудат центрифугируют. Для посева иссле­дуют осадок. По­сев производят на те же среды. Биологическая проба - центри- фугаты культур по 0,2 мл вводят мышам внутри­венно или внутри­брюшинно, либо морским свинкам внутрикожно. В случае гибели мы­шей в течение 1-х суток или появле­ния некроза кожи у морских свинок ставят реакцию нейтрализации (на мышах или мор­ских свинках). Через 24­48 часов.
Гонорея Отделяем ое уретры у мужчин. Отделя­емое уретры, влагали­ща и шей­ки матки и прямой кишки у женщин, девушек из урет­ры, влага­лища и прямой кишки. Материал
собирают
стерильным
тампоном,
петлей или
ложечкой
Фолькмана.		 С
момента
заболева
ния.		 Микроскопия - окраска по Граму.
Посев - на асцит­агар и среду Бейли
непосредственно после забора материала.		 Сразу после бактериос копии. Через 24­48 часов. Материал следует брать не раньше, чем через 2-3 часа после
последнего мочеиспускан ия. Женщины до взятия материала не должны спринцеваться

Гнойное Берут То же. То же. То же.
выделе- стерильным
ние конъ- влажным
юнктивы тампоном.
(при забо-
левании
глаз).
Кровь. 5-6 мл берут С 3-й Серологическое На
из локтевой недели. исследование - следующ
вены в реакция ий день.
стерильную связывания
пробирку. комплемента.
Дизенте Испражне Небольшое С начала Посев - на среды Предвари Материал
рия ния. количество заболева Плоскирева, тельно на следует
(3-5 г) мате- ния и Левина, Эндо, 2-й день, собирать до
риала берут повторн желчный бульон окончател применения
из подклад- о на ср. Плоскирева с ьно на 4-5 антибиотиков.
ного судна протяже антибиотиком. день.
или горшка нии
(у грудных заболева
детей соби- ния.
рают с пеле­нок) и поме­щают в про­бирку с гли-
цериновой
смесью.
Сбор мате­риала можно производить не дожида­ясь дефека­ции, с помо­щью сте­рильного ректального тампона, вводя его в кишку на 6-8 см, или с по­мощью алю­миниевой петли.
Кровь. С 9-10- Серологическая На Реакция
го дня. реакция - реакция следующ агглютинации
агглютинации ий день. считается по-
(дизентерийный ложительной
Видаль), реакция для шигелл

пассивной (непря­мой) гемагглю- тинации (РИГА, РИГА) - с целью выявления в сыво­ротках или копро- фильтратах анти­тел к шигеллам. Флекснера в титре 1:200, для шигелл Зонне, Гри- горьева-Шига и Ньюкастл - в разведении 1:100.
Дифте- Пленка Для сбора С начала Посев - Предвари Материал из
рия или слизь материала заболева производят тельно зева следует
из зева и пользуются ния. непосредственно через 48 брать натощак
носа. 2 стериль- после забора на часов, или не ранее
ными ватны- среду окончател чем через 2
ми тампона- теллуритово- ьно через часа после
ми. Матери- кровяной агар. 72 часа. еды.
ал из зева
берут на гра- Микроскопия - При При профилак-
нице между через 24-48 часов обнаруже тических об-
пораженным делают мазки из нии следованиях
участком и выросшей морфолог тампон из зева
здоровой культуры. ических и носа засева-
слизистой Окраски синькой дифтерий ют на одну ча-
оболочкой. Леффлера, а так ных шку. Если ма-
Материал из же по Нейссену. палочек териал пере-
обеих нозд- изучают сылают в ла-
рей можно тип и бораторию, за-
брать одним определя бор делают ув-
тампоном. ют лажненным
Тампон при токсичнст тампоном
взятии ь. Ответ (тампон сма-
материала на 4-5 чивают 5% р-р
поворачива день. глицерина в
ют всеми физиологическ
сторонами. ом растворе.
Стерильным То же. То же. То же.
При тампоном
дифтерии собирают
уха, глаз, отделяемое
половых или пленку с
органов, пораженного
кожи. участка.
Коклюш Слизь из Два способа С начала Посев - при сборе Предвари «Кашлевые
и задней забора: заболева материала тельно на пластинки»
паракок стенки 1. Метод ния. «кашлевыми 3 день, применяют
люш глотки. «кашлевых пластинками» окончател для сбора
пластинок» чашки после ьно на 5-7 слизи у
- открытую взятия материала день. кашляющих
чашку со помещают в детей.

средой (угольно­казеиновый агар) поме­щают на рас­стоянии 8-12 см перед ртом боль­ного в мо­мент кашля; 2. Для взятия слизи там­пон извлека­ют из про­бирки и сги­бают о край пробирки под углом 110-120. Язык фикси­руют шпате­лем и согну­тую часть тампона проводят по задней стенке глотки 2-3 раза. С начала заболева ния и в случаях подозре ния на заболева ние
коклюш
ем.		 термостат.
При взятии там­поном посев про­изводят на уголь­но-казеиновую среду, непосред­ственно после за­бора. Тампон тща­тельно втирают в поверхность сре­ды (для подавле­ния роста сопут­ствующей микро­флоры перед по­севом поверх­ность среды оро­шают раствором пеницилина со­держащим 7,5 ЕД пенициллина в 1 мл). Микроспория - мазки из вырос­шей культуры. Окраска по Граму.		 Тампоном материал можно брать вне кашлевого приступа.
Колиэн-
териты		 Испражне
ния.		 Следует брать пос­ледние порции. Не­сколько граммов со­бирают в пробирку с физиологиче ским раст­вором или с глицериново й смесью. С 1-го дня. Посев - на среду Эндо,
Плоскирева,
Левина.		 Через 3-4 дня. Посев лучше производить у постели больного. У грудных детей - материал собирают с пеленок.

Рвотные
массы.		 Собирают в
стерильную
пробирку.		 То же. Посев - на среду Эндо.
Агглютинация - проводят отбор колоний пробной агглютинацией на стекле со смесью ОВ-сывороток. Агглютинирующи еся колонии отсе­вают на мясо- пептонный агар.
Лепто-
спирозы		 Кровь. 10-12мл берут из локтевой вены
стерильным
шприцем.		 С начала заболева ния.
С начала заболева ния.
С 8-9		 Микроскопия - 1­2 мл крови сме­шивают с 2 мл 1,5% р-ра лимон­нокислого натрия. Отстаивают. Вер­хний слой микро- скопируют в тем­ном поле. Про­сматривают не менее 10 раздав­ленных капель. Посев - 3-4 мл крови засевают на водопроводную воду с добавле­нием кроличьей сыворотки. Выра­щивают при тем­пературе 22-300 С. Биологическая проба - вирулент­ность культуры определяют на белых мышах. Биологическая проба - 3-4 мл крови дефибрини- руют и заражают животных (морс­ких свинок). Зара­жение внутри­брюшинно, под­кожно либо внут­ривенно. Серологические Предвари
тельный
ответ
срузу
после
микроско
пии,
окончател ьный - через 8-10 дней - 1 месяц.
Через 6­10 дней.
На		 После гибели
животного
лептоспиры
обнаруживают
ся в печени и
почках.
Серологическу

Моча.
Ликвор.		 1-2 мл берут в
стерильную
посуду.
4-6 мл. берут в стерильную посуду.		 дня.
В
период 7-8 дня до 3 месяцев.		 исследования - 2 мл крови для постановки реакции
агглютинации и лизиса.
Посев - на
водопроводную
воду с
добавлением
кроличьей
сыворотки.		 следующ ий день.
Через 8­10 дней.		 ю реакцию повторяют через 3-5 дней. Положительно й считается реакция только титра.
Заболе- Гной из Материл С начала Посев - материал Предвари
вания, фурункул собирают по заболева тщательно расти- тельный -
вызыва- ов, возможност ния. рают на поверх- после
емые флегмоны и из глубо- ности чашки со бактериос
патоген ких слоев средами (молоч- копии,
ными стерильным но-солевой агар, окончател
кокками ватным там- мясо-пептонный ьный - на
1)стафи- поном либо агар, 5% кровяной 2-3 день.
лакокка платиновой агар) засевают так
ми, петлей. же на сахарный
2) стре- бульон (1% глю-
птококк коза) и на среду
ами, Тароцци. Микро-
скопия - мазки из
выросшей куль-
туры. Окраска по
Граму.
Токсигенность - Предвари
определяют спо- тельно -
собность плазмо- на
коагуляции, гемо- следующ
литическую спо- ий день,
собность и спо- окончател
собность вызы- ьный - на
вать некроз при 2-3 день.
внутрикожном
введении.
Слизь из Собирают То же. Исследование То же.
зева и ватным ведется так же,
носа. тампоном. как и гноя.
Мокрота Собирают в То же. То же. То же.
предыдущая
к содержанию
следующая

Источник: Н.И.Хотько, «ОРГАНИЗАЦИОННЫЕ И МЕТОДИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПРОТИВОЭПИДЕМИЧЕСКОГО ОБСЛУЖИВАНИЯ НАСЕЛЕНИЯ» 2005

А так же в разделе «Приложение 16 Методы забора и бактериологического исследования материала при инфекционных заболеваниях »