Ежегодно в мире происходят десятки миллионов родов, а значит, существует неиссякаемый источник СК. Их получение не несет опасности для здоровья донора. Коллекции образцов СК пуповинной крови представляет реальную альтернативу банку образцов костного мозга. Преимущество пуповинной крови состоит в том, что она крайне редко бывает инфицирована вирусами и другими агентами, представляющими потенциальную опасность для здоровья реципиента. Проблема состоит в хранении заготовленной пуповинной крови или выделенных из нее и сконцентрированных СК. С этой задачей и призваны справиться высокоспециализированные медицинские учреждения, которые называются банками СК.

Создание донорских банков можно проследить еще с конца XIX – начала XX вв. В 1900 г. в Вене была создана первая донорская станция женского молока. Через 10 лет аналогичный донорский пункт женского молока был создан в Бостоне. Первый банк роговиц был создан в США в 1944 г. В 1950 г. для целей реконструктивной и пластической хирургии был организован Военно-морской банк органов и тканей США. В 1950-х гг. в США и Европе появились банки замороженной спермы для искусственного оплодотворения. В 1979 г. при Национальном институте стандартов и технологии США создан National Biomonitoring Specimen Bank, в котором накапливаются все образцы тканей, клеток, органов человека и млекопитающих. Под контролем правительственных учреждений создается гигантская библиотека биоинформатики. В Калифорнии в 1961 г. создан огромный банк нервной ткани и спинномозговой жидкости, который использует материал, как для клиники, так и для научных целей. Более специализированные банки биопсийного и аутопсийного материала человека организованы при медицинской школе Тафте кого университета для задач молекулярной патологии, а также для нужд челюстно-лицевой хирургии. В Советском Союзе в начале 80-х гг. по инициативе академика Ю. А. Овчинникова был создан национальный банк клеточных линий и тканей в Институте цитологии в Ленинграде, которым руководил профессор Г. Пинаев.

Сейчас почти во всех странах мира существуют программы по созданию банков СК пуповинной крови. Организатором этой программы стал профессор X. Броксмейер. Под его руководством была заложена первая коллекция пуповинной крови для аллогенных трансплантаций. Полученные им данные послужили толчком к созданию банков-регистров, хранящих безымянные (безвозмездно сданные) образцы. В 90-х гг. XX в. был создан Нью-Йоркский Центр Крови – первое подобное учреждений. Тогда же были созданы банки пуповинной крови в Милане и Дюссельдорфе. Сегодня в мире насчитывается около 50 активных банков-регистров, в которых хранится в общей сложности около 200 тыс. готовых для трансплантации единиц пуповинной крови.

А знаете ли вы?

В 1992 г. была создана первая «именная» коллекция СК. Ее создатель Девид Харрис заморозил клетки пуповинной крови своего первенца. Сегодня Харрис владеет крупнейшим банком СК пуповинной крови. В 1998 г. была проведена первая в мире трансплантация «именных» СК пуповинной крови девочке с нейробластомой (опухолью мозга). Ребенка удалось спасти.

В 1998 г. общее число проведенных трансплантаций пуповинной крови уже превышает 600, а в 2000 г. в мире проведено 1200 трансплантаций СК пуповинной крови, из них 200 родственных.

Известен случай, когда 6-тилетний ребенок с анемией Фанкони был вылечен с помощью СК пуповинной крови своего новорожденного брата, причем его брат был рожден после искусственного оплодотворения (ЭКО). Среди полученных эмбрионов был выбран один наиболее совместимый с реципиентом и не содержащий признаков болезни.

В 2001 г. были публикованы первые официальные данные о возможности применения трансплантации СК пуповинной крови у взрослых пациентов. Из них более 90% – успешные.

Журнал Национальной Академии Наук США (PNAS USA) опубликовал интересное сообщение о том, что через 15 лет хранения в жидком азоте СК пуповинной крови полностью сохраняют свои биологические свойства. С этого момента, т.е. с 2003 г., криогенное хранение СК стало рассматриваться, как «биологическая страховка».

Мировая коллекция СК, хранящихся в банках-регистрах, достигла 72 ООО образцов. По данным на сентябрь 2003 г. в мире произведено уже 2592 трансплантаций СК пуповинной крови, из них 1012 – взрослым пациентам. К 2004 г. общая мировая коллекция СК пуповинной крови приблизилась к 400 тыс. образцов. В мире произведено около 5 тыс. трансплантаций пуповинной крови. Для сравнения, число трансплантаций костного мозга за тот же период составило около 85 тыс.

В России также создаются банки пуповинной крови. Первый российский Банк стволовых клеток создала компания Криомедика, а в соответствии с Приказом Минздрава РФ от 25.07.2003 №325 «О развитии клеточных технологий в Российской Федерации» и Решением Комитета здравоохранения г. Москвы в России в ближайшем будущем возникнут еще как минимум 2 государственных банка пуповинной крови: один – федеральный, другой – созданный по инициативе московского правительства и финансируемый из бюджета города. К осени 2005 г. официально заявили о себе Поволжский банк гемопоэтических клеток в Самаре, осуществляющий хранение именных и безымянных образцов, и дочернее предприятие московского КриоЦентра – КриоЦентр Санкт-Петербург (Покровский банк стволовых клеток). Ведутся работы по созданию БСК и в других регионах страны. Для России, конечно, этих банков недостаточно. Тем более что некоторые из БСК до сих пор не прошли сертификации и не имеют лицензий, дающих им право на оказание медицинских услуг.

В будущем все банки будут общественными, донорскими. Пуповинную кровь туда будут доставлять из родильных домов. Не исключено, что «родная» пуповинная кровь когда-нибудь может пригодиться для лечения самого донора, однако банки будут открыты для пользования и из них смогут брать донорский материал многие гематологические учреждения. Для выявления скрытых инфекций, каких-либо редких генетических заболеваний в банках будет находиться вся необходимая информация о последующей судьбе ребенка и о его родителях, об их болезнях.

Впервые в Петербурге квалифицированный забор пуповинной крови был официально осуществлен специалистами роддома №2. После рождения ребенка специалисты данного учреждения помещают его пуповинную кровь в специальные контейнеры. Дальнейшее хранение клеток, а также лабораторно-диагностическое обследование, криоконсервацию и выделение осуществляет медицинский центр Next Level.

Так называемые «именные» или «семейные» банки СК пуповинной крови' представляют собой альтернативу, банкам-регистрам. Эти банки осуществляют целевое хранение клеток, направленное на их перспективное применение в случае возникновения заболевания у самого ребенка или его ближайших родственников. Собственником хранящихся клеток в данном случае выступает не сам банк, а ребенок, из пуповинной крови которого были получены клетки, или уполномоченное им лицо (обычно один из родителей). Соответственно, и некоторые основные принципы работы именных банков отличаются от принципов работы банков-регистров.

Банки-регистры могут осуществлять подбор совместимого донора лишь при определенном объеме хранилища. Как правило – это десятки тысяч образцов. В отличие от банков-регистров «именные» банки не имеют подобных ограничений. Тем не менее «именное» хранение СК пуповинной крови развивается не менее активно, а количество образцов, хранящихся в частных банках, не уступает коллекции банков-регистров. Отдельные коллекции уже давно превысили десятки тысяч образцов. Бесспорным лидером среди «именных» банков является CBR (Cord Blood Registry) со штаб-квартирой в Аризоне (США). Его коллекция по данным на сентябрь 2004 г. насчитывала около 75 тыс. образцов.

Большинство коммерческих «именных» банков предоставляют будущей матери или медицинскому учреждению, в котором она предполагает рожать, специальный набор. Он содержит все материалы, необходимые для работы акушерки или медицинской сестры в процессе забора пуповинной крови: стерильные перчатки, дезинфицирующий раствор, контейнеры для пуповинной крови и крови матери (для проведения диагностических тестов), необходимые информационные документы и сопроводительные формы, транспортную упаковку.

Для того чтобы избежать ошибок, забору пуповинной крови должно предшествовать интенсивное обучение персонала родблока. Врач всегда должен быть готов ответить на вопрос будущей матери о том, стоит ли ей сохранять СК пуповинной крови своего ребенка. Для этого он должен знать, нет ли в истории семьи онкологических заболеваний, нет ли риска развития гематологических заболеваний или болезней обмена, не страдает ли кто из старших членов семьи нейродегенеративными заболеваниями или аутоиммунными болезнями типа диабета или волчанки.

Не стоит забывать и о болезнях сердечно-сосудистой системы, особенно если ранние инфаркты и инсульты встречались в семейной истории. Все это – не что иное, как основные показания к созданию семейного клеточного страхового фонда.

Особое внимание возможности сохранить СК следует уделить в случае, если, эта беременность уже не первая, а у кого-то из детей существуют перечисленные выше проблемы.

Владея достоверной информацией, грамотный врач может не только проконсультировать будущую мать в интересующих ее вопросах, но и дать некоторые более конкретные рекомендации – подсказать, где и как можно организовать сбор пуповинной крови, какому из банков СК следует доверить клетки своего ребенка.

Информация, о новых клеточных технологиях, а именно – о СК, постоянно расширяется и должна учитываться будущими родителями, которые хотели бы использовать уникальную возможность застраховать жизнь и здоровье своего малыша.

А знаете ли вы?

Британским женщинам разрешат быть добровольными донорами яйцеклеток, необходимых для проведения экспериментов по клонированию, сообщает газета The Times.

Согласно новым рекомендациям Британского комитета по оплодотворению и эмбриологии человека (Human Fertilisation and Embryology Authority), которые будут одобрены..., донором яйцеклеток по желанию сможет стать любая женщина, а не только женщины, которые получают лечение от бесплодия. Сторонники новых правил отмечают, что участие женщин-добровольцев позволит покрыть нехватку донорских яйцеклеток, препятствующую производству клонированных ЭСК. Достаточное количество донорских яйцеклеток позволит ученым работать над созданием новых препаратов для лечения болезни Паркинсона, диабета и ряда других заболеваний.

Противники нововведений указывают на неоправданный серьезный риск для здоровья, которому женщины будут подвергаться добровольно во имя спекулятивных исследований.

Терапевтическое клонирование производится путем введения ядра взрослой клетки в «пустую» яйцеклетку, из которой предварительно была удалена ДНК. Полученные в результате процедуры эмбриональные СК будут генетически идентичны пациенту, предоставившему ДНК. Именно поэтому ЗСК могут быть впоследствии трансплантированы этому человеку без риска отторжения. Женщинам, изъявившим желание стать донорами яйцеклеток, независимо от того, где впоследствии они будут использоваться, заплатят символические 15 фунтов Стерлингов, хотя представители Британского комитета по оплодотворению и эмбриологии человека предлагают увеличить размер оплаты до 250 фунтов стерлингов.

Новые правила, по словам экспертов, будут содержать меры предосторожности против возможных спекуляций. Все женщины, решившие подвергнуться процедуре, будут опрошены представителями независимых служб, которые должны подтвердить, насколько добровольным является решение женщины. Кроме того, врачи, участвующие в получении донорских яйцеклеток, не могут сами участвовать в исследованиях с использованием полученного материала.

Скандал с южно-корейским специалистом по клонированию Хванг-У-Соком, который был уличен в подтасовке результатов по клонированию СК человеческих эмбрионов, разразился именно после появления первых сообщений об использовании им донорских яйцеклеток своих сотрудниц.

Донорскими яйцеклетками в первую очередь смогут воспользоваться ученые из университета Ньюкасла (University of Newcastle-upon-Tyne) и Эдинбургского университета, которые уже имеют лицензии на терапевтическое клонирование, сообщает The Times.

Собственная кровь всегда на 100% подходит самому ребенку. С большой вероятностью она подойдет и его братьям, и сестрам. Обычно это вероятность 1/4. Но даже когда клетки пуповинной крови используют как донорские, они намного меньше вызывают осложнения и отторгаются, чем из костного мозга и периферической крови.

Найти подходящего донора костного мозга бывает сложно и дорого. Если же в банке хранится ваша пуповинная кровь, она доступна в любой момент. Кроме того, стоимость сбора, выделения и хранения клеток пуповинной крови значительно дешевле, чем СК из костного мозга и периферической крови.

У сбора пуповинной крови имеется существенный недостаток – это его однократность: каждый человек имеет возможность собрать СК пуповинной крови только один раз в жизни при рождении. Минимальный объем, рекомендуемый различными банками, как целесообразный для хранения составляет 40-60 мл. Но эти требования не играют особой роли при «именном» хранении: право принятия решения в этом случае остается за родителями новорожденного, о чьей пуповинной крови идет речь. Тем не менее, учитывая, что в конечном итоге СК предназначены для эффективного клинического применения, нередко проводятся дополнительные процедуры по извлечению некоторого количества крови из сосудов уже родившейся плаценты.

Если собранная пуповинная кровь предназначается для лечения реального пациента, ожидающего трансплантации, а также при заборе пуповинной крови у недоношенных детей или при малом весе плода, необходимо провести перфузию плаценты физиологическими растворами. Также перфузия желательна при многоплодной беременности, особенно если близнецы разнояйцовые и если в ходе обычного забора удалось получить менее 40 мл пуповинной крови.

Процедура сбора пуповинной крови

Процедура сбора пуповинной крови состоит из нескольких этапов: сбора, обработки, замораживания и хранения. Независимо от того, в каком городе рожает женщина, есть возможность собрать кровь и доставить в лабораторию за 24 часа. Комплект для забора пуповинной крови заранее нужно отдать акушерке. Когда ребенок родится, акушерка пережимает и перерезает пуповину, затем вводит в нее иглу от системы, куда поступает кровь. Забор пуповинной крови проводится в шприцы большого объема (50-60 мл) или «мешки» донорской системы. Однако специалисты отмечают, что шприцевый метод имеет ряд преимуществ: он проще, особенно для начинающих медсестер, позволяет получать несколько большие объемы пуповинной крови, сопряжен с меньшим количеством ошибок со стороны персонала. Собранную кровь помещают в контейнер для транспортировки. В нем кровь защищена от ударов, вибрации, резких перепадов температуры и в полной сохранности вместе с сопроводительной документацией доставляется в хранилище. Следующий этап – ее обработка. Кровь взвешивают, подсчитывают количество СК. Затем СК выделяют из пуповинной крови и добавляют к ним криопротектор – раствор, который предохраняет клетки от разрушения при замораживании. Выделенные СК помещают в мешки и криопробирки, разработанные специально для долгосрочного хранения при низких температурах. Каждому образцу присваивают уникальный идентификационный номер. Используемая маркировка гарантирует неприкосновенность СК ребенка. СК ребенка будут храниться в запаянном стерильном и герметичном мешке и в криопробирках в условиях глубокого холода. К каждому образцу прилагают пробирку-«спутник» с тем же идентификационным номером, которая позволяет избежать нежелательного размораживания СК, т. к. при необходимости дополнительных исследований (тестирования, типирования и т.д.) можно использовать именно ее содержимое.

Затем наступает процесс замораживания. Образец с пробиркой-спутником» помещают в специальный контейнср-криобокс, переносят в хранилище и подвергают плавному охлаждению до –80°С, после чего погружают в жидкий азот, в котором он и будет храниться. В каждой ячейке криобокса хранится один образец в мешке или криопробирках с пробиркой-спутником».

Существуют неопровержимые доказательства, что криообработка пуповинной крови не вызывает существенной потери гемопоэтических СК, поэтому возможно получение пуповинной крови в количестве, достаточном для того, чтобы произвести трансплантацию гемопоэтичесих СК.

Когда пуповина новорожденного перерезана, остаток пуповинной крови может быть собран путем пункции пуповины. Профессор X. Броксмейер с соавторами доказали, что такую процедуру можно проводить, когда плацента еще находится в матке или даже уже рождена, поскольку в первые 30 мин после рождения кровь в плаценте и пуповине не свертывается, в зависимости от времени перерезания пуповины и других факторов, таких как масса тела новорожденного, срок беременности и длина пуповины, объем пуповинной крови может составлять до 200 мл. Исследователи рассчитали, что у детей можно выполнять аллогенные трансплантации гемопоэтических СК с использованием пуповинной крови. Из них 60% – при злокачественных заболеваниях крови, 6% – при нейробластоме и 34% – при незлокачественных заболеваниях. Родственные трансплантации дают лучшие терапевтические результаты, чем неродственные. Среди факторов, ассоциированных с большей выживаемостью при родственных и неродственных пересадках гемопоэтических СК, – небольшой возраст реципиентов, ранняя диагностика заболевания, острый лейкоз с низким риском для детей.

Частные компании готовы вкладывать немалые суммы в реорганизацию банков пуповинной крови в России, но обычно речь при этом идет о платном хранении крови в интересах самого донора, т.е. цели у частных и государственных банков пуповинной крови разные, однако и те, и другие должны придерживаться стандартов GMP.

В 2000 г. вступил в силу приказ Минздрава и Минэкономики о введении в действие стандарта отрасли ОСТ 42-510-98 «Правила организации производства и контроля качества лекарственных средств (GMP)», который устанавливает, что с 1 июля 2000 г. приемка в эксплуатацию вновь созданных и реконструированных предприятий-производителей лекарственных средств фармацевтических субстанций, выдача этим предприятиям лицензий на производство, хранение и распространение продукции осуществляются лишь в случае соответствия стандарту GMP в его российском варианте. Международный стандарт GMP (good manufactured practice) включает в себя достаточно обширный ряд показателей, которым должны соответствовать предприятия, выпускающие ту или иную продукцию. GMP для фармацевтических предприятий определяет параметры каждого производственного этапа – от материала, из которого сделан пол в цеху, и количества микроорганизмов на кубометр воздуха до одежды сотрудников и маркировки, наносимой на упаковку продукции.

По сути, GMP – это совокупность ряда российских ГОСТов и СНиПов (строительных, санитарных и пожарных норм). В настоящее время важнейшими элементами концепции GMP являются: *

соответствие всей технологической и контрольной документации на производстве содержанию регистрационного досье на соответствующий препарат; *

жесткий контроль за соблюдением правил, предполагающий не только декларированное, но и фактическое применение санкций к предприятиям-нарушителям.

Приметой времени можно также считать внедрение строгих методических правил в работу государственных органов нормативного контроля лекарств и медицинского оборудования: система качества, по предотвращению конфликта интересов у сотрудников, мер по сохранению конфиденциальности документации и т.п.

Отечественные банки пуповинной крови

В настоящее время лицензии Росздравнадзора на осуществление забора и хранения клеточного материала в России имеют 10 учреждений:

1. ОАО «Институт Стволовых клеток человека» (Гемабанк, Москва). ^

2. ООО «Флора-мед» (Москва).

3. ООО «Желдормфармтранс» (ассоциация Мера-Мед, Москва).

4. ГУЗ г. Москвы «Банк стволовых клеток департамента здравоохранения г. Москвы».

5. ГУ Институт хирургии им. А. В. Вишневского (Москва).

6. ООО «Криоцентр» (Москва).

7. Государственное унитарное предприятие Самарской области «Поволжский банк гемопоэтических клеток» (г. Самара).

8. ЗАО «РеМеТэкс» (Москва).

9. ООО «Бьюти Плаза» (Москва).

10. ООО «Транс-Технологии» (Санкт-Петербург).

Основными задачами банков пуповинной крови являются: *

• организация заготовки и транспортировки пуповинной/плацентарной крови для научных исследований; *

• тестирование и типирование заготовленной пуповинной/плацентарной крови; *

• криогенное хранение образцов СК пуповинной/плацентарной крови человека в жидком азоте; *

• выделение концентрата СК пуповинной/плацентарной крови человека.

Банки предоставляют научным и образовательным медицинским организациям образцы СК пуповинной/плацентарной крови человека для научных исследований. В соответствии с условиями договора, банки также предоставляют образцы СК пуповинной/плацентарной крови физическому лицу, т.е. человеку, заключившему договор с данным банком.

Компания Smart Cells International, имеющая офисы в Европе, Азии и на Ближнем Востоке, сообщает, что всё больше бабушек и дедушек, ищущих подарки для своих внуков, вкладывают деньги в сбор и хранение СК новорождённых для будущего использования.

Директор компании Шамшад Ахмед рассказывает, что в ответ на растущий спрос начата продажа «подарочных ваучеров».

И вот как это работает. Фирма поставляет заказчику комплект (цена $220) для сбора клеток из пуповины только что родившихся младенцев. Акушер собирает образцы и отправляет их компании в Плимут. Там СК хранятся в течение 25 лет и выдаются клиентам по требованию.

Пациенты могут использовать свои клетки при заболеваниях крови вроде лейкемии, а также в случае возникновения раковых образований и при тому подобных проблемах. Общая стоимость услуги $2,2 тысячи.

Smart Cells International открылась 5 лет назад и в настоящее время имеет примерно 5 тысяч клиентов.

По материалам twww.stem-ceii.ru