Исследование процесса агрегации форменных элементов крови


Агрегация форменных элементов крови (преимущественно эритроцитов) — один из важнейших патологических феноменов, возникающих в системе микроциркуляции. Это и обусловливает важность его количественного описания. Существует несколько способов оценки агрегации эритроцитов.
  1. Метод, основанный на прижизненной биомикроскопии. Недостатками метода являются: субъективность в оценке степени агрегации, трудоемкость, необходимость микроско- пирования. Достоинством оценки агрегации эритроцитов путем прижизненной биомикроскопии является возможность с абсолютной достоверностью установить фактическое наличие агрегации или дезагрегации.
  2. Реоскопия — по существу является ротационной или капиллярной (капилляр с внутренним сечением в виде щели) реометрией с той лишь особенностью, что рабочие части прибора прозрачны. Это позволяет исследовать процесс агрегации и дезагрегации в


  3. Рис. 10.20. Внешний вид агрегатограммы н определение индекса агрегации методом силлектометрни (объяснение в тексте).

зависимости от скорости деформации [Goldstone J. et al., 1970]. Использование реоскопии позволяет охарактеризовать агрегацию эритроцитов в отношении размеров и формы агрегатов. Реоскопические исследования осуществляются со взвесями эритроцитов и с цельной кровью.
  1. Метод оценки агрегации эритроцитов по скорости их оседания наиболее прост, но и наименее надежен. Между тем увеличенная СОЭ в подавляющем большинстве случаев свидетельствует о наличии феномена агрегации [Левтов В.А. и др., 1982].
  2. Расчетный метод определения степени агрегации по L. Dintenfass (1962): его суть состоит в вычислении отношения объема свободно осевших форменных элементов (при полном их осаждении) к объему форменных элементов, осажденных принудительно (центрифугированием). К расчетным методам можно отнести также оценку феномена агрегации форменных элементов крови по кривым течения или вязкости.
  3. Фильтрационные методы оценки агрегации по существу аналогичны фильтрационным методикам определения деформируемости эритроцитов.
  4. Фотометрический метод количественного определения агрегации эритроцитов. Существует по меньшей мере два варианта его. Первый заключается в регистрации изменения оптической плотности взвеси отмытых эритроцитов (100 000 ± 20 000 эритроцитов в 1 мкл) под влиянием вещества, вызывающего агрегацию, — индуктора агрегации. В качестве индуктора используется, например, краситель алциановый голубой, который, по мнению O’Brien (1971), уменьшает заряд эритроцитов и тем самым облегчает образование конгломератов клеток. Изменения оптической плотности исследуемой суспензии эритроцитов регистрируют по времени графически. Критерием оценки степени агрегации служит скорость изменения оптического сигнала. Недостатком метода является длительная подготовка проб, в процессе которой нарушаются существующие в цельной крови межэритроцитарные взаимодействия. По-видимому, используя этот метод, можно достоверно судить лишь о способности суспензии эритроцитов в буферном растворе с pH 7,4 изменять оптическую плотность под влиянием конкретного индуктора агрегации.

Вторым вариантом фотометрического метода является так называемая силлектометрия. В основу метода положена графическая регистрация уменьшения интенсивности света, рассеиваемого кровью после прекращения перемешивания исследуемого образца. Заслуга теоретической разработки этого метода принадлежит отечественным исследователям, разработки которых в этом направлении обобщены в монографии «Реология крови» [Левтов В.А. и др., 1982].
В качестве основного критерия для оценки агрегации эритроцитов используется индекс агрегации, рассчитываемый как единица, деленная на время, в течение которого амплитуда агрегатограммы уменьшается вдвое (рис. 10.20). При усилении процесса агрегации эритроцитов скорость изменения оптического сигнала возрастает и коэффициент агрегации увеличивается. Соответственно уменьшается площадь под агрегатограммой. При нанесении данных агрегатометрии на логарифмическую бумагу получается прямая линия. Тангенс угла на
клона этой прямой к оси времени также может быть использован в качестве показателя агрегации эритроцитов.
Сопоставление данных, полученных силлектометрическим методом и методом витальной микроскопии, показывает качественное совпадение результатов. 

Источник: Г.И. Назаренко, А.А. Кишкун, «Клиническая оценка результатов лабораторных исследований» 2000

А так же в разделе «Исследование процесса агрегации форменных элементов крови »