Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени
В последние годы появилась такая модификация ПЦР, как ПЦР в режиме реального времени (ПЦР-РВ). Ей предшествовал вариант с флуоресцентной детекцией ПЦР-продукта в конечной точке: в реакционную смесь добавляли специфический флуоресцентный зонд и далее через 30—40 циклов определяли уровень флуоресценции.
В реакционную смесь при ПЦР-РВ также добавляется или специфический флуоресцентный зонд (TaqMan и др.), или интеркалирую- щий краситель (SYBR GreenI и др.), но в данном случае амплификатор позволяет детектировать флуоресценцию каждый цикл и наблюдать рост количества ПЦР-продукта в каждой пробирке, и далее по имеющейся калибровке определять точное исходное количество образца в пробе (рис. 6.7).
Прогресс в этой области позволяет использовать несколько независимых зондов в реакции, проводить одновременную детекцию нескольких ПЦР-продуктов и создавать ПЦР-системы мультиплексного формата.
А так же в разделе «Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени »
- 6.1. ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ
- Денатурация ДНК-матрицы
- Стадия отжига праймеров.
- Альтернативные ПЦР-методы амплификации нуклеиновых кислот
- Преимущества РЦР перед другими методами
- ИССЛЕДОВАНИЕ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ МЕТОДОМ МИКРОЧИПОВ
- ПОЛУЧЕНИЕ МЫШЕЙ С НОКАУТОМ (KNOCK-OUT) И НОКИНОМ (KNOCKIN) ГЕНОВ - МЕТОД НАПРАВЛЕННОГО МУТАГЕНЕЗА
- ПРИМЕНЕНИЕ РЕГУЛЯТОРНЫХ МИКРО-РНК В ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ
- MiRNA-146
- MiRNA-155
- MiRNA-223 — регулятор пролиферации и активации нейтрофилов
- ГЛАВА 7 МЕТОДЫ ОЦЕНКИ СИСТЕМЫ ЦИТОКИНОВ
- Клетки-продуценты цитокинов
- Клетки-мишени
- Лабораторная работа 7-2 Определение активности интерферона
- Лабораторная работа 7-3 Определение МИФ-активности