Для изучения механизмов клеточного иммунитета, действующего в организме человека и животных, были разработаны модельные, экспериментальные, системы in vitro и in vivo.
Таблица 9.1
Сравнительная характеристика проявлений клеточного и
гуморального иммунного ответа

9. ILL Реакция цитотоксических Т-лимфоцитов (IJTJI; CD8 Т клеток)
При вирусной инфекции, опухолевом росте, отторжении трансплантата основными эффекторными клетками являются цитотоксические Т-лимфоциты (CD8 Т-клетки).
Этапы цитолитического действия CD8 Т-клеток включают: распознавание антигена предшественниками, их пролиферацию и дифференцировку до зрелых эффекторов, собственно процесс лизиса измененных своих вирусинфицированных и раковых клеток или чужеродных клеток трансплантированной ткани. Изучение клеточных и молекулярных механизмов, действующих на каждом этапе, было проведено главным образом в опытах in vitro.
Приемы экспериментальной работы достаточно просты. Например, к суспензии клеток-мишеней, зараженных вирусом и
201
меченных хромом-51, добавляют гтримированные к антигенам вируса лимфоциты, которые выделяют от мышей, предварительно иммунизированных данным вирусом. После определенного времени совместной инкубации (4-24 часа), в течение которого происходят лизис клеток-мишеней и выход в супернатант хрома-51, культуральные пробирки центрифугируют и определяют количество метки в супернатанте, являющееся эквивалентом числу разрушенных клеток-мишеней (рис. 9.1).

Рис. 91. Схема одвого ю вциитл» ооспиюни цтегоксяческой реяхцин.
От мышей, иммунизированных вирусом (условно, вирусом А), через 4-9 /шей после введения антигена получают клетки лимфатического узла или селезенки. Оценку цитотоксической активности таких примированных клеток проводят in vitro с помощью клеток-мишеней, проинкубированных с вирусом и радиоактивной меткой 5!Сг. К клеткам-мишеням добавляют в разном соотношении тестируемые клетки. В результате реакции цитолиза клеток-мишеней в супернатанте накапливается 5|Сг. Количество метки в супернатанте является эквивалентом числу разрушенных клеток
Процесс лизиса чужеродных клеток состоит из нескольких этапов (рис. 9.2). Первый этап — специфическое связывание примированных CD8 Т-клеток с поверхностным чужеродным антигеном (пептидами вирусных, трансплантационных, раковых антигенов). Взаимодействие антигенраспознающих рецепторов цитотоксических Т-клеток с соответствующим антигеном усиливается дополнительными неспецифическими молекулярными структурами клеточной поверхности, которые обеспечивают наиболее эффективную динамическую адгезию между клетками (см. ниже). Второй этап, получивший название “летального удара”, представляет собой основное событие, предопределяющее гибель клетки-мишени. Механическое разобщение эффектора и клетки-мишени на этом этапе не спасает последнюю от гибели. Для этого этапа характерно повышение проницаемости клеточной мембраны, нарушение баланса натрий-калиевого насоса. Механизм, лежащий в основе “летального удара”, не достаточно ясен. Одним из факторов, повреждающих мембрану клетки, выступает лимфотоксин (фактор (3 некроза опухолей). Третий этап, приводящий к лизису клетки-ми- 202

Рис. 9.2. Этапы взаимодействия цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ; Т-кил- леров; CD8 Т-клеток) с клеткой-мишенью.
Первый этап — специфическое связывание ЦТЛ с клеткой-мишенью. Механическое разобщение взаимодействующих клеток спасает клетку-мишень от лизиса. Второй этап — ‘‘летальный удар” — основное событие, предопределяющее гибель клетки-мишени. ЦТЛ должен находиться в состоянии активного метаболизма. При этом жизнеспособность клетки-мишени не является обязательным условием. Механическое разобщение между взаимодействующими клетками на этом этапе не спасет клегку-мишень от гибели. Третий этап — зиключизельный, приводящий к лизису клетки-мишени. ЦТЛ остается неповрежденным и способен к дальнейшему цитолитическому действию
шени, характеризуется увеличением ее объема за счет все большего проникновения Н20 через поврежденную мембрану. В результате этих процессов происходит разрыв мембраны клетки-мишени и ее гибель. Эффекторная клетка сохраняется и способна к дальнейшему цитолитическому действию.