как известно, моделирование является одним из ведущих методов исследования. Это определение приобретает особый смысл и значение в работах с акушерской направленностью, поскольку значительную часть акушерской патологии, материнско-плодовых отношений, поиск новых путей коррекции нарушений можно изучать только в эксперименте (Н.А. Склянова и соавт., 1991).
В связи с этим для исследования состояния мягких тканей родовых путей, регионарных и отдаленных лимфатических узлов нами разработана модель эксперимента на животных, максимально приближенная к клиническому течению послеродового периода у родильниц с акушерскими ранами мягких тканей родовых путей, представляющих группу высокого риска возникновения послеродовых гнойно-воспалительных заболеваний.
Для проведения эксперимента были выбраны белые крысы-самки популяции Wistar. Организм белых крыс характеризуется приспособляемостью и устойчивостью к интеркуррентным инфекциям. Эти животные менее требовательны в отношении пищевого рациона, что
в конкретных условиях немаловажно. Использование крыс, одинаковых по массе, возрасту и с низкой индивидуальной вариабельностью, является необходимым условием для получения достоверных результатов. Указанные достоинства делают этих животных хорошим объектом для исследования различных систем, в том числе и лимфатической системы.
Все крысы-самки, участвующие в эксперименте, были первобеременными, родоразрешились в срок живыми плодами в количестве 5-9 крысят и выкармливали их до выхода из эксперимента. После рождения крысят в первые 4-6 ч у крыс моделировали акушерскую рану.
Для изучения морфофункциональных изменений мягких тканей родовых путей, регионарных и отдаленных лимфатических узлов в динамике развития раневого процесса при использовании современных медицинских технологий животные были разделены на следующие группы. У 16 животных проводили лечение ран с использованием медицинского озона; обработку раны озонированным физиологическим раствором осуществляли в течение 2-3 мин. ежедневно на протяжении 5 дней послеродового периода. У 12 животных рану обрабатывали 1% раствором бриллиантового зеленого один раз в день (традиционное лечение). У 8 животных рану мягких тканей родовых путей не моделировали (контроль).
Объектом исследования служили лимфоидные органы (подвздошные, паховые лимфатические узлы), брыжейка тонкой кишки, мягкие ткани родовых путей (рана промежности). Материал для исследования брали на 5-е и 10-е сутки послеродового периода. Учитывая биологические ритмы изменений лимфоидных органов в течение года и суток, операции и забой животных проводили в весенний период в послеобеденное время.
Для изучения топографии регионарных и отдаленных лимфатических узлов половых органов был применен классический инъекционный метод. Для этого 50% водную взвесь черной туши вводили прижизненно в область раны промежности экспериментального животного и наблюдали особенности регионарного лимфооттока.
Для анализа структурных изменений исследуемых органов весь полученный материал фиксировали в жидкости Теллесницкого. После обезвоживания в серии спиртов и ксилолов по общепринятой методике препараты заливали в парафин-воск. Парафиновые срезы толщиной 5-7 мкм изготовляли на ротационном микротоме и окрашивали гематоксилином Майера, эозином и по Ван Гизону.
При изготовлении гистологических срезов последние делали через длинник лимфатических узлов, что дало возможность изучать их ворота и полюса. Срезы исследовали методом световой микроскопии. Систематические ошибки количественного анализа были максимально уменьшены за счет унификации фиксации, проводки, заливки и приготовления срезов определенной толщины, методов и сроков окрашивания. Выделение структурных компонентов и клеточных форм в лимфатических узлах проводили согласно международной гистологической номенклатуре (Ю.И. Афанасьев, 1970).
При исследовании лимфатических узлов определяли общую площадь среза лимфатического узла, площадь капсулы, краевого синуса, коркового плато, глубокой коры, мозговых синусов, лимфоидных узелков без центров и с центрами размножения. Рассчитывали удельные площади коркового и мозгового вещества, их соотношение, площадь Т-зависимой, В-зависимой зон и общую площадь синусной системы.
Взятие брыжейки тонкой кишки осуществляли для оценки популяции тучных клеток, которые играют важную роль в процессах микроциркуляции при репара- I йеной регенерации (В.В. Виноградов и соавт., 1973).
Брыжейку тонкой кишки растягивали на предметном стекле и окрашивали по В.Н. Горчакову. В ней исследовали популяцию тканевых базофилов, которая функционально связана с микро со судами. Число тучных клеток непостоянно и претерпевает значительные изменения при различных дестабилизирующих воздействиях. Изменение гетерогенности их популяции приводит к изменениям диаметра сосудов. Мы определяли также соотношение зрелых, дегранулированных и тотально дегранулированных форм на 100 клеток. Интенсивность дегрануляции в зависимости от ее типа (экзоцитоз, секреция) для фиксированных тканевых базофилов оценивали по следующим критериям: 0 степень — без грануляции; I степень — появление отдельных гранул вокруг клетки; II степень — значительное количество гранул за пределами клетки при сохранении компактного ее «центра»; III степень — диссеминация гранул в окружающей ткани, замещение клетки россыпью гранул, образование метахроматического пятна на месте клетки.