Метод гетерологичного оплодотворения
Один из объективных методов, позволяющих проводить прямой анализ хромосомного набора единичных сперматозоидов человека, основан на оплодотворении in vitro освобожденных от блестящей оболочки яйцеклеток хомячка сперматозоидами человека и последующей визуализации хромосом мужского пронуклеуса [597, 770]. После обработки через 12-14 часов оплодотворенных яйцеклеток колхицином препараты фиксируют [536, 827] и дифференциально окрашивают.
С помощью этого метода удалось установить ряд принципиально важных сведений о частоте и спектре аномалий хромосом в мейозе у здоровых доноров, а также о влиянии различных факторов на сперматогенез. В общей сложности от здоровых доноров в возрасте от 18 до 65 лет проанализировано более 20 тысяч хромосомных комплементов зрелых сперматозоидов [451]. Трудоемкость, высокая себестоимость, необходимость значительных временных затрат существенно лимитируют возможности широкого применения метода гетерологичного оплодотворения. В настоящее время он утратил свою актуальность и используется в ограниченном числе центров.
Новый импульс исследованиям в этом направлении может дать метод микроинъекции сперматозоидов человека в яйцеклетки — метод ICSI (Intra Cytoplasmic Sperm Injection) (рис. 4.5). Разработанный с целью лечения мужского бесплодия этот метод с успехом применяется в настоящее время и для исследования хромосом мужского пронуклеуса после оплодотворения, осуществляемого путем инъекции сперматозоида человека непосредственно в яйцеклетку лабораторной мыши [185, 193, 508]. Метод исключает селекцию спермиев по их оплодотворяющей способности, что повышает вероятность детекции хромосомных аномалий (см. главу 5).
С помощью этого метода удалось установить ряд принципиально важных сведений о частоте и спектре аномалий хромосом в мейозе у здоровых доноров, а также о влиянии различных факторов на сперматогенез. В общей сложности от здоровых доноров в возрасте от 18 до 65 лет проанализировано более 20 тысяч хромосомных комплементов зрелых сперматозоидов [451]. Трудоемкость, высокая себестоимость, необходимость значительных временных затрат существенно лимитируют возможности широкого применения метода гетерологичного оплодотворения. В настоящее время он утратил свою актуальность и используется в ограниченном числе центров.
Новый импульс исследованиям в этом направлении может дать метод микроинъекции сперматозоидов человека в яйцеклетки — метод ICSI (Intra Cytoplasmic Sperm Injection) (рис. 4.5). Разработанный с целью лечения мужского бесплодия этот метод с успехом применяется в настоящее время и для исследования хромосом мужского пронуклеуса после оплодотворения, осуществляемого путем инъекции сперматозоида человека непосредственно в яйцеклетку лабораторной мыши [185, 193, 508]. Метод исключает селекцию спермиев по их оплодотворяющей способности, что повышает вероятность детекции хромосомных аномалий (см. главу 5).
А так же в разделе « Метод гетерологичного оплодотворения »
- введение
- общие представления о цитогенетике гаметогенеза
- Методы исследования сперматогенеза
- Цитологические методы
- Количественный кариологический анализ незрелых половых клеток
- Цитогенетические методы
- Анализ синаптонемных комплексов
- Анализ хромосомного набора сперматозоидов
- Метод FISH
- Молекулярно-генетические методы исследования мужского бесплодия
- Методы исследования оогенеза
- Анализ хромосом в первом делении мейоза
- Метафаза I
- Первое полярное тельце
- Анализ хромосом во втором делении мейоза
- Метафаза II
- второе полярное тельце
- Перспективные методы анализа мейотических хромосом
- Методы исследования хромосом в раннем эмбриогенезе
- Методы исследования хромосом в постимплантационном периоде
- Клетки хориона (плаценты)
- Культивирование клеток хориона
- «Прямые» препараты
- Митотическая активность клеток цитотрофобласта
- Клетки амниотической жидкости
- лимфоциты пуповинной крови плода
- Принципы изучения генеза хромосомных аномалий в постимплантационном и постнатальном периодах онтогенеза
- Происхождение гетероплоидии
- Происхождение хромосомных мутации