Образование второго полярного тельца (ВПТ) стимулируется оплодотворением или агентами, активирующими партеногенетическое развитие. Хромосомы ВПТ претерпевают изменения, характерные для
а)              б)
Рис.4.10. Хромосомы неоплодотворившегося ооцита на стадии метафазы II. Окраска QFH/AcD: а — кариотип 23,Х; б — диплоидный ооцит (46,ХХ); в — фрагмент метафазной пластинки с преждевременно разошедшимися хроматидами (указаны стрелками)

Рис.4.11. Ооцит на стадии метафазы II (фрагмент метафазной пластинки) и первое полярное тельце (слева). FISH с ДНК-зондом DXZ1, специфичным к прицентромерному району Х-хромосом ы
стадий анафазы и телофазы, и остаются блокированными на стадии интерфазы. Поскольку ВПТ никогда не вступает в митоз, для анализа его хромосом используют молекулярные методы (FISH и ПЦР). С помощью этих методов показано, что частота анеуплоидных ВПТ составляет около 25 % [725]. К настоящему времени опубликовано большое число работ с использованием этих методов для доимплантационной диагностики хромосомных и, в основном, моногенных болезней [756].
Более полное представление о частоте и спектре хромосомных аберраций, возникающих при втором делении мейоза, а также о влиянии различных факторов на хромосомный аппарат в этот период созревания ооцита, может дать прямой хромосомный анализ ВПТ. Реальность такого подхода была продемонстрирована в оригинальных экспериментах на мышах при трансплантации ВПТ в цитоплазму зиготы [641]. В дальнейшем этот метод был с успехом применен для анализа хромосом ВПТ и у человека [874]. Высококачественные хромосомные препараты получают путем слияния ВПТ с нормальной или энуклеированной зиготой мыши под действием электрического импульса. Полученные таким способом хромосомы идентифицируют с помощью стандартной дифференциальной окраски [415]. В дальнейших исследованиях эти авторы успешно совместили инъекцию ВПТ человека в цитоплазму ооцита мыши и электрошок. Метод оказался эффективным для получения метафазных хромосом изолированного ВПТ. Он нашел практическое применение для прижизненного анализа материнского набора хромосом в дробящемся зародыше человека как с помощью традиционных, так и молекулярно-цитогенетических методов хромосомного анализа [872]. Подробно с техникой приготовления хромосомных препаратов из первого и второго полярных телец можно ознакомиться в прекрасно иллюстрированной монографии Ю. Верлинско- го и А. Кулиева [871].
Визуализация хромосом во втором делении мейоза может быть достигнута с помощью окадаевой кислоты, которая индуцирует преждевременную конденсацию интерфазных хромосом — Premature Condensation Of Chromosome (РСС) обоих пронуклеусов в оплодотворенной яйцеклетке и ВПТ [57, 377, 378]. Именно этот подход позволил установить ряд важных сведений о поведении мейотических хромосом в оогенезе мышей-носительниц транслокации. В частности, были получены прямые доказательства существования механизма «предделения» и обнаружена предрасположенность отдельных хромосом к преждевременному разделению сестринских хроматид. Попытки применения окадаевой кислоты для проведения аналогичных исследований у человека оказались неудачными [378].