В зависимости от хромосом, участвующих в перестройке, методы идентификации ее родительского происхождения могут быть различными.
Так, наличие материала Y-хромосомы в любом из вариантов перестроек de novo однозначно свидетельствует о ее происхождении в сперматогенезе (рис. 4.22, 4.23). Однако точная локализация точек разрыва, равно как и идентификация хромосомных маркеров, возможна лишь при использовании комплекса методов: традиционного кариоти- пирования и специальных методов анализа. Например, дифференциальная деконденсация гетерохроматина, методы RBA и FPG в сочета
нии с методом FISH, а также ПЦР пективность такого комплексного подхода при анализе аномалий в системе половых хромосом.
Точное родительское происхождение структурных аберраций может быть установлено лишь при использовании полиморфных локусов ДНК. Напомним (см. главу 3), что большинство структурных перестроек, возникающих de novo (изохромосомы, Робертсоновские и реципрокные транслокации, делеции, инверсии, дупликации, центрические и ацентрические фрагменты и пр.) (рис. 4.24), уникальны и, соответственно, требуют индивидуального подхода к установлению механизмов их происхождения.
Рис.4.23. Структурная перестройка Y-хромосомы у пациентки с синдромом Шерешевского—Тернера (кариотип 46,X,idic(Yp)). ФГА-стимулированные лимфоциты периферической крови. FISH c ДНК-зондом DYZ3

Рис. 4.24. Структурные перестройки хромосом. ФГА-стимулированные лимфоциты периферической крови (а—в) и цитотрофобласт (10 недель беременности) (г): а — del(Xp21::?) (FISH c локус-специфическим ДНК-зондом); б — dic(X) (FISH c ДНК-зон- дом DXZ1'); в — 46,XX/47,XX,+der(18) (FISH c цельнохромосомным ДНК-зондом 18); г — 45,XX,der(7;13) (окраска QFH/AcD)
Заключение
Таким образом, современные цитогенетические методы исследования, дополненные при необходимости методами ДНК-анализа, позволяют проводить изучение геномных и хромосомных мутаций на разных этапах онтогенеза человека и достаточно точно устанавливать механизмы их возникновения. В зависимости от стадии развития набор таких методов может быть различным. Каждый из рассмотренных подходов имеет свои недостатки и преимущества. Наиболее перспективным для цитогенетики развития человека является комплексный подход, основанный на объединении основных принципов цитогенетики гаметогенеза, пре- и постимплантационной диагностики и клинической цитогенетики. Прогресс способов получения материала плода для прижизненных лабораторных исследований предоставляет такую уникальную возможность.