Экспериментальная часть работы была выполнена моими ассистентками С. И. Баренбойм и М. Г. Скундиной в физической лаборатории Московского института профессиональных болезней проф. И. П. Разенко- ва, который принял живейшее участие в обсуждении плана и характера предпринятой работы. Советы его всегда бывали очень ценными и удержали нас от ошибок и трудных путей.
Нам предстояло выяснить, что переливаемая от умершего кровь является не только изотонической жидкостью, пополняющей кровопотерю, подобно растворам хлористого натрия или многим другим минеральным растворам, но что она может в новом организме успешно выполнять свою главную функцию — поглощение и переноску кислорода тканям.
Вторая задача состояла в том, чтобы по возможности выявить, к а- ким образом такая кровь, будучи перелитой, повышает кислородный фонд реципиента: путем ли стимуляции ретикуло-эндотелиальной системы или путем абсолютного увеличения числа активно действующих пересаженных эритроцитов?
Обе эти проблемы приводили нас к необходимости произвести точное измерение кислородного обмена в крови животных до обескровливания, после такового и наконец после вливания им посмертной крови. Именно цифровые показатели дыхательной функции крови должны были служить наиболее бесспорным доказательством того, что выживание максимально обескровленных собак обусловлено не пополнением их сосудистой системы индифферентной жидкостью, а введением в кровяное русло живых эритроцитов, способных сразу же нести свою основную функцию и питать кислородом все ткани организма.
Лично я полагал, что в наших опытах мы должны изучать и измерять газовый обмен всей крови подопытных собак на каждом этапе опытов, т. е. до обескровливания, после обескровливания и после трансфузии им посмертной крови. Я считал, что возможные неточности цифровых показателей кислородного и углекислого обмена будут иметь тем меньшее значение, чем с большими количествами крови мы будем иметь дело па каждой фазе эксперимента. И, наоборот, ошибки и неточности анализов могли, по моему мнению, случиться тем легче, чем с меньшими дозами крови придется манипулировать при каждой пробе.
Эти общие соображения выдвигали необходимость провести предпринимаемую работу в специальных пневматических камерах. Но обсуждение нашей работы с руководителем лаборатории проф. И. П. Разенковым выявило ряд таких технических трудностей, что пришлось от этого плана отказаться и выбрать другой путь. Дело в том, что каждое животное нужно сначала длительно приучать к спокойному индифферентному пребы
ванию внутри камеры, без чего все цифры газообмена теряют свое значение. Требуются иногда недели, чтобы собака привыкла спокойно стоять внутри камеры часами, а мы постоянно рисковали бы потерять такое уже дрессированное животное при обескровливании, раньше чем будут сделаны новые исследования газообмена и трансфузии крови. Понятно также, что при такой методике мы не смогли бы проверить свои данные на болыпам числе животных.
И. П. Разенков предложил нам остановиться на методике Баркрофта, дающей весьма точные данные кислородного обмена. Все инструкции и проверку инструментария, равно как и частый параллельный контроль отдельных измерений, мы получили от специалистов названной лаборатории С. Е. Северина и А. М. Блиновой. Таким образом, точность получаемых данных была максимально обеспечена. Результаты своей работы С. И. Баренбойм и М. Г. Скундина опубликовали в журнале «Военно-санитарное дело», 1931, № 7, стр. 21.
Ряд неожиданных трудностей сразу же предстал перед нами в этой экспериментальной работе. Дело в том, что, имея главной установкой изучение кислородного обмена в переливаемой крови, мы должны бы*ли всемерно стремиться сохранить нормальный кислородный баланс в крови убиваемых собак-доноров. Это значит, что нельзя было их убивать ни хлороформом, ни тем более повешением, как это делал при своих опытах
В.              Н. Шамов. Пересыщенная углекислотой кровь собак, погибающих от асфиксии, была бы менее всего пригодна для количественного определения в ней кислорода.
Было решено убивать животных электрическим током, что дает смерть почти моментальную и не отражается на качественном составе крови. Но вот тут-то и обнаружилось, что свертываемость свежей крови собак чрезвычайно велика и как выпущенная наружу, так и внутри кровеносных сосудов она свертывается неизмеримо быстрее, чем это бывает с кровью человека. Это было видно каждый раз при выпускании крови из сонной артерии собак-реципиентов: к концу самой операции, т. е. в течение 2—4 минут 200—300 мл крови в измерительном стакане превращались в сплошной плотный сгусток. Но и внутри сосудов свертываемость крови собак оказывалась чрезвычайно высокой; это можно было наблюдать у некоторых животных, погибших от самого кровопускания: кровь свертывалась и в канюле, и в крупных венах почти на глазах, иногда до окончательной остановки сердцебиений, а когда через полчаса или даже раньше мы пытались собрать кровь из нижней полой вены погибшей собаки, то вводимая в сосуд канюля попадала в сплошной, компактный кровяной сгусток.
Мы пробовали делать прижизненные обильные инъекции лимоннокислого натрия под кожу собак, предназначенных служить донорами, но и это не дало положительных результатов. Не помогали и внутривенные инфузии цитрата, не говоря уже про то, что сами эти инъекции собаки переносят довольно плохо.
Казалось, что мы столкнулись с непреодолимыми препятствиями, если бы нам не помогла работа С. С. Брюхоненко, опубликованная в журнале Химико-фармацевтического института ВСНХ и касающаяся изучения различных гемофилизирующих веществ, в частности так называемого Вауег-205. Введение их животным, не причиняя особо вредных побочных действий, очень быстро вызывает у них почти полную несвертываемость крови, продолжающуюся, по наблюдениям Брюхоненко, свыше восьми часов. Так как получить в то время в достаточных количествах гепарин мы не могли, то по нашей просьбе С. С. Брюхоненко снабдил нас достаточным количеством бензо-эхт-розы (benzo-echt-rosa), — веществом,
которое обладает свойством связывать только тромбин крови, не вызывая в ней никаких побочных изменений и не оказывая общего токсического действия на организм животного.
По указаниям С. С. Брюхоненко, вполне подтвердившимся при наших опытах, нужно добавить один грамм этого препарата к 1250 мл крови in vitro, дабы достичь полной несвертываемости. In vivo необходимо увеличить дозировку до 0,15 г на 1 кг веса животного. Именно из этого расчета мы и вводили бензо-эхт-розу нашим собакам-донорам; инъекции производились в яремную вену животных, обнаженную сквозь небольшой разрез на шее. Вещество применялось в 5% растворе на дистиллирован- пой воде. Края раны этого разреза позволяли наблюдать как по мере введения бензо-эхт-розы кровь гемофилизировалась и сосуды начинали кровоточить. Считая, что искусственная гемофилия с этого момента уже наступила, можно было минут через 5—8 убивать животное электриче ским током. И действительно, с этих пор нам удавалось без труда собирать по 300—800 мл совершенно жидкой крови от собак, убитых за 7—13 часов перед тем.
Нет сомнения, что в то время только благодаря получению от С. С. Брюхоненко вышеупомянутой бензо-эхт-розы мы смогли успешно выполнить экспериментальную часть работы на собаках. По счастью, у людей кровь очень долго не свертывается и собирается жидкой без всякой обработки еще много часов после смерти.
Впрочем, об обработке крови людей, хотя бы в самом конце агонального периода, ни при каких условиях не могло бы быть речи. Два обстоятельства служили бы тому решительным препятствием. Во-первых, если введение собакам-реципиентам даже больших доз крови, обработанной бензо-эхт-розой, никогда не вызывало никаких токсических явлений, а само вливание протекало без всякой видимой реакции со стороны животных, то введение этого раствора собакам-донорам в вену (30—40 мл 5°/о раствора), как правило, вызывало довольно значительное беспокойство и возбуждение животного.
Во-вторых, неприятное свойство бензо-эхт-розы состоит в том, что будучи сама сильнейшей краской, она вызывает интенсивнейшее и очень стойкое прокрашивание всего животного в ярко-розовый цвет. Не только легкие и все паренхиматозные органы становятся окрашенными уже че рез 5—7 минут после инъекции, но кожа, все видимые слизистые оболочки, даже склеры глаз интенсивно окрашиваются в ярко-розовый цвет. И эта окраска упорно держится у некоторых собак свыше месяца.
Наконец было замечено, что кровь, обработанная бензо-эхт-розой, будучи перелита другой собаке, вызывает и у этой последней относительную гемофилию. Это можно было видеть по тому, что кровоточивость раны значительно возрастала к концу переливания, чего не было в начале операции при отыскивании и сепаровке вены. Часто в силу этого повязки упорно промокали кровью, иногда образовывались значительные подкожные гематомы, а в одном случае просачивание сквозь кожные швы потребовало наложения энергичной давящей повязки.
Остается заметить, что трупы убитых собак сохранялись при температуре от — 1 ° до +1 °, согласно указаниям Костюкова, который показал, что при этой температуре инфекция вен брыжейки из кишечника впервые начинается через 20—22 часа после смерти животного.
Групповая принадлежность крови не учитывалась, так как по всем существующим наблюдениям у собак это обстоятельство не имеет никакого значения. В соответствии со всеми литературными данными и наши работы показали, что смешивание крови любых собак протекает без явлений агглютинации.
Вся экспериментальная работа С. И. Баренбойм и М. Г. Скундиной может быть разделена на 5 серий и была проведена на 47 собаках.
Первая се р и я — ориентировочная, проведенная на 12 собаках, послужила как для проверки опытов В. Н. Шамова, так и для усвоения техники самого обескровливания реципиентов. Последнее оказалось делом довольно ответственным, несмотря на то, что можно было руководствоваться превосходной работой Д. Н. Беленького (Баку), основывавшего свои советы на громадном личпом материале. Для главной цели намеченной экспериментальной работы эти первые наблюдения были непригодны но двум причинам: во-первых, часть животных была принята от других врачей лаборатории уже использованными для других опытов. Во-вторых, в первой серии мы наркотизировали собак значительными дозами морфина (5—10 мл 1°/о раствора), что должно было сказываться на дыхательной функции и газообмене между тканями и кровью хотя бы потому, что собаки долго потом оставались вялыми и не принимала пищи.
Два животных этой серии умерли: одно от чрезмерной анемии, до начала переливания, а второе от эмболии при переливании крови, содержащей сгустки. Остальные собаки хорошо перенесли переливание и дали значительный подъем гемоглобина. Приведу примеры.
У собаки № 1 весом 8,5 кг и имевшей 75% НЬ выпущено 250 мл крови и влито внутривенно 500 мл солевого раствора; НЬ упал до 45%. Через час выпущено еще 250 мл крови и влито опять 250 мл солевого раствора; НЬ упал до 20%. Через два часа после этого собаке было влито 350 мл посмертной крови, взятой через IV2 часа после смерти другой собаки (погибшей под наркозом при постороннем опыте). На другой день собака вялая, НЬ 30%; через три дня НЬ 53%. Нагноение в ране; собака вялая. В следующие дни НЬ колебался от 45 до 55%. Животное оправилось.
Собака № 2 весом 14 кг, НЬ 75%. Выпущено 850 мл крови, влито 1000 мл солевого раствора; НЬ 35%. После этого ей влито 100 мл посмертной крови, собранной через час после смерти другой собаки, погибшей под наркозом при дру-. гом опыте. На              следующий день гемоглобин поднялся до 45 %,              но              собака              вялая.
Тогда ей было              перелито еще              65 мл посмертной крови, собранной              еще от              одной
собаки через два часа после смерти. Гемоглобина на следующий день оказалось 48%, но животное оставалось скучным. Однако через двое суток общее состояние собаки совершенно восстановилось, несмотря на небольшое падение гемоглобина; его стало 43%.              Прослежена в              течение трех недель.
Собака №              4 весом 10 кг              имела НЬ 95%. Выпусканием у              нее              300 мл              крови
гемоглобин был доведен до 40%. Обескровливание перенесла хорошо. В 600 мл физиологического раствора ей было влито 60 мл трупной крови, добытой через три часа после смерти донора. Гемоглобин поднялся до 48% ив следующие дни собака была вполне здорова. Гемоглобин колебался в пределах от 48 до 50°/о.
Вторая серия. Изменения газового состава крови при средних степенях обескровливания и последующих переливаниях трупной крови.
Пользуясь указаниями Д. Н. Беленького, мы исчисляли степень обескровливания собак, относя вес выпускаемой крови к весу всего тела живой собаки. Пределы выносливости отдельных собак действительно оказались весьма неопределенными. При таких больших кровопусканиях, как 5—7% живого веса собаки, нужны величайшие предосторожности, дабы сохранить животному жизнь хотя бы временно, до трансфузии. Нередко животные погибали уже при потере крови, равной 3% веса тела. Поэтому обескровливание до 2% веса собак в этой второй серии надо считать средними степенями.
Обращаясь к показателям кислородного газообмена в крови, замечу, что, по данным Лилиенштадта, у собак объемный процент кислорода в крови (vol% О2) колеблется в пределах от 16,1 до 22,4; степень насыщения кислородом от 92,5 до 94%. У людей, по данным некоторых авторов, степень насыщения артериальной крови кислородом обычно
держится в пределах 94—97%, тогда как vol% О2 у них составляет примерно 18,5—20°/о для мужчин, 16,5% для женщин и 16,1% у детей.
Так как потеря крови, естественно, должна отражаться не только на размере абсолютного газообмена, но должна сказаться также падением объемного процента кислорода и в каждой оставшейся порции крови, то для наших целей было очень важно проследить это падение после кровопусканий, а установив размер падения vol% О2 следить за подъемом этой функции после переливания посмертной крови. Закономерность понижения связывания кислорода была изучена в работах Эндра и Ней- гауза *; они же показали заметное влияние кровотоперь и на щелочной резерв крови. Наблюдения этих авторов подтверждаются на каждой из наших собак, как то видно по приводимым кривым газообмена.
Каждому животному этой серии делалось определение vol% О2 до опыта, чаще всего дважды. Затем производилось кровопускание в количестве 2°/о веса тела, после чего через день по тому же методу устанавливалась степень падения vol% О2. Тогда этим собакам переливали трупную кровь, чаще всего в количестве, соответствовавшем выпущенной накануне, и повторными анализами изучались степень и быстрота восстановления vol% О2. Кровь для исследований бралась со всеми необходимыми предосторожностями, т. е. в шприц, смазанный вазелиновым маслом, подкожной пункцией яремной вены и бедренной артерии. Кровь доноров предварительно обрабатывалась антикоагулянтом. Всего опытов в этой серии было четыре, из них одна собака контрольная.
Собака № 6. Вес 4,800 кг

Дата	Hb в %	Эритроциты	Степень насыщения vol°6 02
			артерии]	вены	артерии	вены
15/11 16/11 17/11 2111 23/11 2/III	60 35	4210000 2 345 000	87 82,5	44	17,2 11,4	10,3	Выпущено 96 мл крови т. е. 2% веса тела Собака вялая
	62 57	3 850 000	93,8 91,5	64,3	20,5 17	17,7	Перелита посмертная кровь другой собаки, через шесть часов после смерти

Собака № 7. Вес 10 кг

Дата	НЬ в %	Эритроциты	Степень насыщения vol% 02
			артерии	вены	артерии|	вены
15/И 16/И	55	3 480 000	89		17,7		Выпущено 200 мл крови, т. е. 2% веса тела
18/11 21/II	32	2 565 000	87,5	54	10,2	10,8	Перелито 147 мл посмертной крови, собранной через семь часов после смерти
22/II 3/III	47 45	3 100 000 2 710000	87 86	46,6	13,3 15,6	13,6

1 Е n d г е s und Neuhaus. Die Wirkung d. Aderlasses auf d. Blutgase und das Saurebasengleichgewicht. Zeitschr f. d. gesammte experimentelle Me- dicin., Bd. 47, 1925.

Дата	НЬ в %	Эритроциты	Степень насыщения vol% 02
			артерии	вены	артерии	вены
15/И 16/И	60	3 390 ООО	92		22
							Выпущено 200 мл крlt;gt;*
17/11							ви, т. е. 2% веса тела Собака вялая
	42	2 715000	90		15,2	15,1
21/II							Перелито 230 мл посмертной крови, взятой через 5*/г часов после смерти
22/II	55	3210000	92		19		Собака бодрая
3,/Ш	42	2 590 000	86,6	60	16,6

Собака № 9. Контрольная, вес 14 кг

Дата	НЬ в %	Эритроциты	Степень насыщения vol% 0^
			артерии	вены	[артерии	вены
15/И	40	3 080 000	90		15,2
16/И							Выпущено 280 мл кро
							ви, равное 2% веса
							тела
18/И	32	2 572 ООО	91,4		12,7
25/И	45	3 280 000	90,7		11,2		Собака вялая
3/III	40	2 680 000	91,4	70	16,9	14,5	Хорошее состояние

Анализируя представленные данные и диаграммы, нетрудно заметить, что во всех случаях средних кровопусканий отмечается выраженное снижение по главному показателю — vol% О2 как в артериальной, так it в венозной крови. Напротив, степень насыщения кислородом при средних степенях кровопотери бывает снижена лишь незначительно. Зато переливание собакам трупной крови каждый раз давало быстрое и весьма значительное повышение дыхательной функции крови, что отмечалось по немедленному увеличению объемного процента Ог.
Контрольная собака постепенно тоже восстановила самостоятельно потерянную кровь довольно быстро, что можно объяснить энергичной регенеративной способностью при средних и малых степенях обескровливания.
Третья серия. Колебания газообмена крови при больших кро- волотерях и последующей трансфузии трупной крови.
Совсем иную картину мы получили в третьей серии, когда стали выпускать собакам от 5 до 7% крови по отношению к их весу. Это была главная серия всей экспериментальной работы.
Она проведена на 20 собаках, но шесть из них погибли от самого кровопускания или тотчас же, на операционном столе, или переживал около суток, но все же не дождавшись переливания. Разумеется, часть этих животных: можно было бы спасти своевременным переливанием посмертной крови, но нам необходимо было получить данные газообмена после обескровливания, что приходится делать не тотчас после выпускания крови, а выждав некоторый промежуток времени для выравнивания и относительной стабилизации кровообращения. Наконец, и сами исследования по методу Баркрофта берут довольно много времени. Зато животные, перенесшие эти массивные кровопотери, и дождавшиеся переливания посмертной крови, компенсировали нас за все перенесенные неприятности, дав порой громадные скачки на кривой кислородного обмена. Это видно из приводимых протоколов и диаграмм:

Дата	НЬ в %	Эритроциты | 1	Степень насыщения vol% 02
			артерии	вены |	артерии|	вены
8/III 12/111	70	5 610 000	94	62	23,5	21	Выпущено 480 мл крови — 6,5% веса тела. Влито 700 мл физиологического раствора
13/Ш	29	1 830 ООО	94,6	88,4	10,7	10	Собака очень вялая. Влито 230 мл посмертной крови через 10 часов после умерщвления
14 III	35	3 105 000	94	71	15,2	15,5	Собака живет, значительно кашляет
17/III	55		95,4	71	18,4	17,8	Кашляет, но бодрая
20/Ш	42	2 685 000	92,3	68,2	15,8	15,5	Без перемен
23/111	35	2 620 000	98	42	16,3	15,7	Сильный кашель
28/III	49	2 855 000	97	50	17,5	17,3	Кашель меньше
2/IV	46	2 400 000	96 I	42,6	16,6	16,3	Собака бодрая. Прослежена два месяца

Собака № 18. Вес 8,400 кг

Дата	НЬ в %	Эритроциты	Степень насыщения vol% 02
			артерии	вены	артерии	вены
1 28/III	85	4 890 000	87,7	65	27,4	25,0	Обескровлена на 4,5% веса
29/111							тела выпусканием 370 мл
							крови. Влито 200 мл физио
							логического раствора
30/III	45	2 130 000	90	47	17,4	17,3	Очень вялая. Перелито 370 мл
							посмертной крови — 4% ве
							са собаки. Кровь 6-часовой
							консервации в трупе
1 /IV	60	3 240 000	95,6		24,9		Собака бодрая
4/IV							Кровавый понос. Резкая сла
							бость
5/IV							Погибла. Острый эпидемиче
						i	ский гастроэнтерит

Собака № 20. Вес 4,400 кг

Да ата	НЬ в %	Эритроциты	Степень насыщения ч артерии вены артерии			/о\% 02 вены
6/IY	48	3 200 000		63		21
7/IV							Выпущено 310 мл крови, рав
							ное 7% веса тела. Влито
							450 мл физиологического
							раствора. Беспокойна; со
							стола не смогла сойти сама
8, IV	г 22	620 000		49		12,8	Лежит, не двигаясь. Перели
							то 160 мл посмертной кро
							ви от собаки, убитой во
							семь часов назад, 4%.
9/IV	35	2 130 000		53		14,6	Собака стала бодрая
11/IV	35	1 370 000		72		15,2
13Д V	36	1 520 000		71,4		15,8	Совершенно оправилась
21/IV	53	4 665 000		67		18,6	Здорова. Прослежена больше
							месяца

Дата	НЬ в %	Эритроциты	Степень насыщения vol% 02
			артерии	вены	артерии	вены
28/И	90	5 175 ООО	98,6	78,9	25,7	I
29/11							Выпущено 440 мл крови, т. е. 5% веса тела. Влито
							450 мл физиологического
30/III	36	2 010 000	92,2		14,6		раствора Собака очень вялая
2/IV	32	1 180 000	90,1	61,3	10,3	9,6	Собака вялая
4/IV	32	1 445 000	92	51	12	11,2
7/1V	35	1 535 000	93	68	8,7	9,2	Собака очень вялая
9/IV	38	1 870 000	90	66,1	14,5	14,2	Стала бодрее
11/IV	36	2 590 000	96		13,4
14/IV		1	96,8	79,6	16,7	15,9	Медленно поправляется

Нетрудно отметить, что вышеприведенный протокол и кривая контрольной собаки указывают на чрезвычайно мед