АНАЛИЗ КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА ПО СОДЕРЖАНИЮ ДНК

  Исследование позволяет дифференцировать клетки костного мозга по фазам синтеза ДНК (стадии Gl, S, G2+m). Большинство клеток костного мозга делятся через разные промежутки времени. Отрезок времени между концом одного митоза и концом следующего называется клеточным циклом. Весь цикл распадается на две части: процесс деления (митоз) и подготовка к нему (интерфаза). Удвоение ДНК происходит в интерфазе, причем начинается задолго до митоза и заканчивается также до его начала. Период синтеза ДНК называется
S-периодом; промежуток между окончанием митоза и началом S-периода называется Gl-ne- риодом, промежуток между окончанием S-периода и началом митоза — С2-периодом. В интерфазы происходит удвоение не только ДНК, но и всей массы клетки. Рост клетки идет в течение всех периодов интерфазы, но особенно быстро — во второй ее половине — в S- и 02-периодах. В это время очень интенсивно синтезируются РНК и белок. К началу митоза синтетические процессы замирают и возобновляются в следующей интерфазе.
Таблица 7.39. Параметры клеточного цикла мнелокарноцнтов при различной патологии
[Шмарой Д.А., 1997]

Заболевания

S-фаза, %

G2+m, %

G1/0, %

S+G+m, %

S/(G2+m), %

Здоровые

12,3±0,3

3,8+0,17

83,9+0,4

16,2+0,4

3,34+0,15

Лейкозы (дебют или рецидив):






• острый миелобластный лейкоз,

10,6±0,7

2,55+0,40

85,2+1,4

14,5+1,46

4,45+0,41

• острый лимфобластный лейкоз,

15,7±1,5

4,0±0,46

80,3+1,8

19,7+1,8

4,73+0,45

« лимфосаркома с лейкемизацией,

14,9±1,44

2,89±0,35

82,4+1,5

17,8+1,6

6,62+1,15

• бластный криз хронического миелолейкоза

14,7±|,54

3,2810,38

81,8+1,63

18,0+1,58

5,0+0,81

Лейкозы, ремиссия:






• острый миелобластный лейкоз,

15,6±1,06

4,20+0,36

80,0+1,32

19,8+1,38

4,0+0,25

• острый лимфобластный лейкоз,

!5,2±0,95

4,83+0,53

79,8+1,22

20,2+1,25

3,88+0,27

• лимфосаркома с лейкемизацией,

14,5±1,15

5,24+1,52

80,1+2,0

19,8+2,0

4,0+0,51

• хронический миелолейкоз

12,4±1,38

3,72+0,64

83,8+1,86

16,2+1,86

3,71+0,59

Анемии:






• железодефицитная,

12,7±0,6

3,76+0,29

83,6+0,9

16,4+0,7

3,37+0,50

• пернициозная,

36,1±3,0

6,28+0,94

57,6+2,6

42,3+2.6

7,40+1,73

• аутоиммунная гемолитическая,

20,4±1,4

5,95+0,49

73,7+1,87

26,3+1,9

3.50+0,20

+ апластическая

7,63±1,2

1,98+0,36

90,4+0,36

9,6+1,4

4,22+0,56

Большинство специализированных клеток костного мозга либо не делятся совсем, либо делятся чрезвычайно редко и не находятся в митотическом цикле. Теоретически выход клеток из митотического цикла возможен в любой период интерфазы (Gl, S и G2), но практически абсолютное большинство выходят из стадии G1. Выход из цикла может быть обратимым (под воздействием каких-то факторов клетка может приступить к синтезу ДНК и разделиться, например, лимфоциты периферической крови входят в цикл и делятся под воздействием ФГА) или необратимым (гранулоциты крови при гемобластозах). Клетки костного мозга, которые находятся в митотическом цикле, могут проходить его с различной скоростью. Быстрее всего его проходят клетки-предшественницы зрелых форм (у морфологически недифференцируемых клеток-предшественниц гемопоэза цикл составляет около 8 ч). Определение содержания ДНК в каждой клетке клеточной суспензии позволяет получить распределение клеток по различным фазам клеточного цикла.
Анализ клеток костного мозга проводят с использованием ДНК-специфических красителей, возбуждающихся в ультрафиолетовой области. Выявление самых незначительных различий во флюоресценции позволяет идентифицировать анеуплоидные, а также активно пролиферирующие клетки. По соотношению делящихся и специализированных клеток в костном мозге можно судить о состоянии костного мозга, а у больных с гемобластозами заблаговременно предсказывать развитие бластного криза. Изучение митотического цикла клеток костного мозга по содержанию ДНК позволяет выявлять клетки метастатических новообразований, диагностировать и следить за течением гемобластозов, оценивать функциональное состояние костного мозга. Наиболее оптимальную информацию о состоянии костного мозга можно получить при одновременном анализе содержания ДНК в клетках костного мозга и определении антигенов на оболочке этих клеток с помощью моноклональных антител к различным антигенам, экспрессируемым той или иной популяцией клеток костного мозга. Параметры клеточного цикла миелокариоцитов при различной патологии представлены в табл. 7.39.
Анализ цикла клеток костного мозга с целью выявления ДНК проводят для диагностики властных кризов при лимфопролиферативных заболеваниях, дифференциальной диагностики анемий, а также для выявления патологии созревания и дифференцировки клеток костного мозга.

Источник: Г.И. Назаренко, А.А. Кишкун, «Клиническая оценка результатов лабораторных исследований» 2000

А так же в разделе «  АНАЛИЗ КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА ПО СОДЕРЖАНИЮ ДНК »