предыдущая
к содержанию
следующая

Репликация вирусов


Полиовирус явился моделью для расшифровки репликации всех РНК-вирусов, в том числе и пикорнавирусов. Кроме полиовируса, существенный вклад в этот процесс внесло изучение репликации вируса ящура.
Клеточными рецепторами для полиовируса, коксаки В вирусов, эховирусов и некоторых риновирусов человека являются иммуноглобулины. Для других пикорнавирусов рецепторами клеточной поверхности служат другие молекулы, включая гепаринсульфат, липопротеины низкой плотности, экстрацеллюмер- ные протеины и интегрины. После проникновения в клетку и разрушения оболочки вириона VPg отделяется от вирионной РНК клеточными ферментами. Пикорнавирусы обладают КЭП — независимым механизмом трансляции. Рибосомы связываются с 5'-нетранслируемой областью генома вируса, известной как рибосомальный входной сегмент [IRES], Этот сегмент вирусной геномной РНК связывается специфически с клеточными белками, которые играют ключевую роль в начале синтеза вирусных белков и РНК. Геномы всех пикорнавирусов имеют З'-поли (А) участок, который кодируется скорее вирусом, чем добавляется полиаденилирующими ферментами клетки-хозяина. Функция этих поли(А) сегментов неизвестна, но их длина, казалось, прямо коррелировала с инфекци- онностью вируса — РНК геном пикорнавирусов содержит одну открытую рамку считывания, которая транслируется в один полипротеин. Полипротеин расщепляется посттрансляционно кодируемой вирусом протеиназой с образованием 11 или 12 белков. 5'-концевая область генома кодирует структурные белки VP4, VP2, VP3 и VP1 в указанном порядке. Средняя область кодирует неструктурные вирусные белки, включая одну вирусную протеазу. 3'-конец генома кодирует другие неструктурные белки, включая вторую протеазу и РНК-зависимую РНК полимеразу.
Синтез вирусной РНК происходит в репликативном комплексе, который включает РНК матрицы, кодируемую вирусом РНК полимеразу и несколько других вирусных и клеточных белков, тесно связанных с вновь собранными гладкими цитоплазматическими структурами. Синтез комплиментарных цепей начинается на З'-концах вирионной РНК с использованием белка VPg в качестве праймера. Основную массу репликативных продуктов в репликативном комплексе составляют полноразмерные комплиментарные (—)РНК, среди которых встречаются плюс-цепи, транскрибированные одновременно вирусной РНК- полимеразой.
Из-за отсутствия КЭП-структуры на 5'-конце у пикорнавирусных мРНК эти вирусы способны вовлекать необычный механизм прекращения трансляции
клеточных мРНК; одна из протеаз пикорнавирусов инактивирует КЭП-струк- турный комплекс, который необходим для присоединения клеточных мРНК к рибосомам. Таким образом, репликация пикорнавирусов характеризуется не только цитоцидным эффектом, но также очень эффективной продукцией новых вирионов. После эклипс периода и менее чем за 3 часа урожай может достичь 103 вирионов на 1 клетку.
Вирус гепатита А обычно трудно адаптируется к размножению в культуре клеток. Во многих культурах клеток устанавливается персистентная инфекция без ЦПД. Максимальный выход вируса (6,0—9,0 ТКИД50/мл) получают при механическом разрушении клеток с целью освобождения вируса.
При заражении культуры клеток цитопатическим мутантом НМ175А синтез вирусной РНК обнаруживали через 6 часов, а максимальное накопление вируса — через 12—27 часов. ЦПЭ развивается через 2—3 дня, урожай вируса достигает 8,7 lg БОЕ/мл (20 инфекционных единиц на клетку). Характерной особенностью репродукции вируса гепатита А является синтез небольшого количества негативно полярной РНК и быстрая инкапсидация почти всего пула вновь синтезированной (+)РНК во все периоды репликативного цикла [792]. 
предыдущая
к содержанию
следующая

Источник: В.А. Сергеев, Е.А. Непоклонов, Т.И. Алипер, «Вирусы и вирусные вакцины» 2007

А так же в разделе «Репликация вирусов »